hPLIC-2分子RNA干涉稳定细胞系的建立及鉴定

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篇1：hPLIC-2分子RNA干涉稳定细胞系的建立及鉴定

hPLIC-2分子RNA干涉稳定细胞系的建立及鉴定

目的:建立人源性泛素类似蛋白hPLIC-2(human protein links IAP and cytoskeleton-2)knockdown稳定细胞系.方法:将RNA干涉载体稳定整合于MCF-7细胞中,建立hPLIC-2 knockdown细胞系.结果:从经抗性基因筛选的48个单细胞克隆中获得6个hPLIC-2表达被显著抑制的.细胞克隆. 结论: 利用RNA干涉技术成功建立了hPLIC-2 knockdown稳定细胞系,为hPLIC-2分子的功能研究提供细胞模型.

作 者：潘传英 李楚芳 刘萱 陈宏 曹诚 PAN Chuan-Ying LI Chu-Fang LIU Xuan CHEN Hong CAO Cheng  作者单位：潘传英,PAN Chuan-Ying(西北农林科技大学动物科技学院,陕西省农业分子生物学重点实验室,杨凌,712100;军事医学科学院生物工程研究所,北京,100850)

李楚芳,刘萱,曹诚,LI Chu-Fang,LIU Xuan,CAO Cheng(军事医学科学院生物工程研究所,北京,100850)

陈宏,CHEN Hong(西北农林科技大学动物科技学院,陕西省农业分子生物学重点实验室,杨凌,712100;徐州师范大学细胞与分子生物学研究所,徐州,221116)

刊 名：军事医学科学院院刊  ISTIC PKU英文刊名：BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES 年，卷(期)： 30(2) 分类号：Q25 关键词：hPLIC-2   RNA干涉   细胞系  

篇2：稳定表达hHCN2基因 HEK293细胞系的建立

稳定表达hHCN2基因 HEK293细胞系的建立

目的`:培育稳定表达hHCN2基因的细胞系,建立一种表达研究心肌离子通道的有效模型.方法:通过脂质体转染的方法,将重组pcDNA3-hHCN2真核表达载体导入人胚肾细胞(HEK293细胞),以G418压力筛选转染细胞,并对其进行全细胞膜片钳记录.结果:经600μg/ml压力筛选后,获得抗性细胞克隆,并用全细胞膜片钳技术记录到克隆hHCN2通道编码电流.结论:本实验采用脂质体转染法成功地培育出G418抗性HEK293细胞,为进一步研究克隆离子通道结构和功能的关系奠定基础.

作 者：赵欣 杨向军 白霞 李红霞 程绪杰 蒋文平ZHAO Xin YANG Xiang-Jun BAI Xia LI Hong-xia CHENG Xu-jie JIANG Wen-ping  作者单位：赵欣,杨向军,李红霞,程绪杰,蒋文平,ZHAO Xin,YANG Xiang-Jun,LI Hong-xia,CHENG Xu-jie,JIANG Wen-ping(苏州大学附属第一医院心内科,江苏,苏州,215006)

白霞,BAI Xia(江苏血液病研究所,江苏,苏州,215006)

刊 名：中国应用生理学杂志  ISTIC PKU英文刊名：CHINESE JOURNAL OF APPLIED PHYSIOLOGY 年，卷(期)：2006 22(2) 分类号：Q786 关键词：细胞系   基因转染   膜片钳  

篇3：稳定表达细胞色素P4501A1人肝癌细胞系的建立

稳定表达细胞色素P4501A1人肝癌细胞系的建立

目的:建立稳定表达人细胞色素P4501A1(CYP1A1)的人肝癌细胞系(Bel-7402).方法:通过将人细胞色素P4501A1(CYP1A1)的表达质粒转染到人肝癌细胞系(Bel-7402),经G418抗性筛选得到稳定的克隆并扩大培养成系,Western Blotting检测蛋白的.表达.细胞增殖试验鉴定CYP1A1的多环芳烃类底物二甲基苯并蒽(DMBA)对Bel-7402/1A1细胞的增殖抑制作用.双核微核实验对Bel-7402/1A1细胞进行了遗传毒理的短期实验.结果:转染后筛选得到的Bel-7402抗性克隆,Western Blotting检测表明有较高的CYP1A1蛋白表达.细胞暴露于DMBA时,Bel-7402/1A1与Bel-7402细胞相比,细胞增殖明显抑制.双核微核试验表明Bel-7402/1A1细胞的微核率随DMBA浓度增高而显著增加,Bel-7402无明显变化.连续传代后仍有CYP1A1标志酶EROD的较高表达,该酶活性能被CYP1A1抑制剂α-萘黄酮抑制.结论:建立了一个新的稳定表达CYP1A1的1个肝癌细胞系(Bel-7402/CYP1A1),可代谢多环芳烃化合物产生更大的毒性.该细胞系可用来筛选能被CYP1A1代谢的化合物,或能抑制CYP1A1活性的化合物,并可用来研究CYP1A1的催化性质及被CYP1A1代谢的化合物的毒性机理.

作 者：庞莉萍 崔景荣 PANG Li-ping CUI Jing-rong  作者单位：北京大学医学部天然药物与仿生药物国家重点实验室,北京,100083 刊 名：中国药科大学学报  ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF CHINA PHARMACEUTICAL UNIVERSITY 年，卷(期)： 37(5) 分类号：Q78 关键词：CYP1A1   Bel-7402   稳定转染   3-甲基胆蒽   二甲基苯并蒽  

篇4：小鼠孤雌胚胎干细胞系的建立及生物学特性鉴定

小鼠孤雌胚胎干细胞系的建立及生物学特性鉴定

目的:探讨建立合适的小鼠孤雌胚胎干细胞建系方法.方法:采用氯化锶联合细胞松弛素B激活B6D2F1杂交小鼠卵母细胞,所获得的囊胚与桑椹胚分别用于孤雌胚胎干细胞的建系,观察两者的建系成功率.结果:共建立了12株小鼠孤雌胚胎干细胞系,这些细胞SSEA-1抗原阳性,SSEA-4,TRA-1-81,TRA-1-60表面抗原阴性,具有AKP活性,保持正常染色体核型,体内外分化分别形成畸胎瘤和拟胚体.结论:采用囊胚和去透明带的`桑葚胚建立孤雌胚胎干细胞系获得成功.该方法为人类纯合子的胚胎干细胞建系提供基础,在自体细胞治疗领域中具有潜在的应用价值.

作 者：银益飞 孙筱放 蒋永华 张文红 郑育红 孔舒 潘倩莹 廖宝平 作者单位：广州医学院第三附属医院妇产科研究所,广东,广州,510150 刊 名：现代生物医学进展  ISTIC英文刊名：PROGRESS IN MODERN BIOMEDICINE 年，卷(期)： 7(7) 分类号：Q2-33 关键词：孤雌激活   胚胎干细胞   氯化锶   细胞松弛素B   小鼠  

篇5：绿色荧光蛋白标记的葡萄糖转运蛋白4稳定表达细胞系的建立

绿色荧光蛋白标记的葡萄糖转运蛋白4稳定表达细胞系的建立

目的:建立稳定表达EGFP标记的葡萄糖转运蛋白4的CHO细胞系,为研究GLUT4在CHO细胞中的转运调节机制奠定基础.方法:采用分子克隆方法构建GLUT4-EGFP的融合蛋白,在FLP-in的CHO细胞系中表达,潮霉素筛选后得到稳定的细胞系.结果:通过共聚焦显微镜的检测,证明了此稳定细胞系的阳性率达到了99%.定位研究表明大部分GLUT4以囊泡形式分布在CHO细胞胞浆内,但是质膜上也有少量的GLUT4.结论:建立了一个稳定表达GLUT4-EGFP的`CHO细胞系,为进一步研究GLUT4的转运提供了一个很好的细胞模型.

作 者：范俊梅 FAN Jun-mei  作者单位：华中科技大学生命科学与技术学院,湖北,武汉,430074 刊 名：现代生物医学进展  ISTIC英文刊名：PROGRESS IN MODERN BIOMEDICINE 年，卷(期)：2007 7(10) 分类号：Q503 关键词：葡萄糖转运蛋白4   构建   CHO细胞系  

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