高质量甘蔗基因组DNA的简便快速提取方法研究

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篇1：高质量甘蔗基因组DNA的简便快速提取方法研究

高质量甘蔗基因组DNA的简便快速提取方法研究

甘蔗是世界上重要的糖料作物和能源作物.目前,甘蔗分子生物学研究已成为甘蔗研究的热点之一.基因组DNA的提取是进行甘蔗分子生物学研究的基础.本研究设计含一系列SDS浓度的提取液,同时设加液氮和不加液氮研磨的对比试验,提取甘蔗不同部位叶片的基因组DNA并进行产量和纯度检测以及分子生物学分析.结果表明,所有提取液提取的甘蔗基因组DNA纯度均很高,A260/A280在1.8-2.0之间,A260/A230大于2,但提取液I(0.75% SDS)提取的甘蔗基因组DNA产量较低;加液氮与否对甘蔗基因组DNA的提取产量和纯度没有影响;以提取的甘蔗基因组DNA为模板,分别用一对扩增SPS(蔗糖磷酸合成酶)基因部分片段的引物和一对ISSR引物进行PCR扩增,所有DNA均能扩增出预期的`条带;用不同的限制性内切酶对所提取的甘蔗基因组DNA进行酶切,所有DNA样品均能完全酶切.本研究得出最佳甘蔗基因组DNA提取方法如下:磨碎甘蔗叶片后,加DNA提取液(SDS: 1.5%;Tris: 100 mM;EDTA: 20 mM;NaCl: 500 mM)于65℃裂解30 min,经酚∶氯仿和氯仿各抽提一次,可获得高产量高质量的甘蔗基因组DNA,能满足后续分子生物学研究的要求.

作 者：黄东亮 覃肖良 廖青 高轶静 方锋学  作者单位：黄东亮,高轶静,方锋学(广西甘蔗研究所,南宁,530007)

覃肖良(中国农业大学,北京,100083)

廖青(广西农业科学院农业资源与环境研究所,南宁,530007)

刊 名：生物技术通报  PKU英文刊名：BIOTECHNOLOGY BULLETIN 年，卷(期)： “”(5) 分类号： 关键词：甘蔗   基因组DNA   提取  

篇2：白木香基因组DNA提取方法研究

白木香基因组DNA提取方法研究

在传统CTAB法的基础上加以改良,建立了一种适于白木香基因组DNA提取的'方法.通过比较改良的CTAB法和试剂盒法,表明改良的CTAB法提取的白木香基因组DNA质量优于试剂盒法;使用改良的CTAB法提取的白木香基因组DNA OD260/OD280比值在1.8～2.0之间,DNA的得率约为172μg/100mg干叶.酶切试验表明,改良的CTAB法提取的DNA能被限制性内切酶完全酶切,可以用于下游研究.改良的CTAB法更适于白木香基因组DNA的提取.

作 者：赵Q 赵树进 ZHAO Xuan ZHAO Shu-jin  作者单位：赵Q,ZHAO Xuan(华南理工大学,生物科学与工程学院,广东,广州,510664;广州军区广州总医院药学部,广东,广州,510010)

赵树进,ZHAO Shu-jin(广州军区广州总医院药学部,广东,广州,510010)

刊 名：河南工业大学学报（自然科学版）  ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF HENAN UNIVERSITY OF TECHNOLOGY (NATURAL SCIENCE EDITION) 年，卷(期)： 27(3) 分类号：Q781 关键词：白木香   DNA提取   CTAB法  

篇3：天牛基因组DNA的提取方法

天牛基因组DNA的提取方法

通过试验探索出3种可以快速、简便地从天牛干标本、液浸标本和新鲜标本中提取DNA模板的方法.对所获得的基因组扩增分析表明,经过PCR之后的DNA能呈现明显的`多态性,同种天牛用同一引物扩增幼虫和成虫所获得的结果相同,可以认为,RAPD技术可以应用于天牛成虫干标本及幼虫浸渍标本的鉴定及系统发育研究中,也证明了这3种方法用于提取不同保存时间、不同种天牛基因组的DNA是切实可行的.

作 者：胡艳红 迟德富 种伟 程红 刘延宾 王雷 胡汇文 Hu Yanhong Chi Defu Chong Wei Cheng Hong Liu Yanbin Wang Lei Hu Huiwen  作者单位：东北林业大学,哈尔滨,150040 刊 名：东北林业大学学报  ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF NORTHEAST FORESTRY UNIVERSITY 年，卷(期)：2006 34(2) 分类号：Q963 关键词：天牛   基因组DNA   提取方法   PCR  

篇4：黄河鲶基因组DNA提取与纯化方法的研究

黄河鲶基因组DNA提取与纯化方法的研究

从鲶肌肉、肝、肾、血中提取基因组DNA.经过0.8%琼脂糖凝胶电泳检测,DNA带型整齐.紫外分光光度仪测定基因组DNA的D260 nm/D280 nm达1.77～1.82,证明所提取基因组DNA质量较好,可用作聚合酶链式反应(PCR)的模板所需.

作 者：吴旭东 张奇 侯玉霞 张文吉 WU Xu-dong ZHANG Qi HOU Yu-xia ZHANG Wen-ji  作者单位：吴旭东,侯玉霞,张文吉,WU Xu-dong,HOU Yu-xia,ZHANG Wen-ji(中国农业大学理学院,北京,100094)

张奇,ZHANG Qi(宁夏回族自治区水产研究所,银川,750001)

刊 名：淡水渔业  ISTIC PKU英文刊名：FRESHWATER FISHERIES 年，卷(期)： 36(1) 分类号：Q48 关键词：鲶   基因组DNA   提取方法  

篇5：基因组DNA提取方法及试剂的对比分析

基因组DNA提取方法及试剂的对比分析

目的比较几种DNA快速提取方法及试剂的`特点.方法应用3种基因组DNA提取试剂及单管滤膜法、自动提取仪,分别制备基因组DNA,比较提取DNA的浓度、纯度、用时及成本的差异.结果不同方法及试剂提取的DNA均可成功应用于HLA分型,析出法浓度高,成本低,但用时较长;自动提取仪法浓度低,用时较短,但成本高,适于大型流式机器操作.结论不同方法及试剂用于提取DNA各具特点,各实验室需酌情选用.

作 者：孟庆丽 王F 梁晓华 于卫建  作者单位：大连市红十字血液中心,辽宁,大连,116001 刊 名：中国输血杂志  ISTIC PKU英文刊名：CHINESE JOURNAL OF BLOOD TRANSFUSION 年，卷(期)：2006 19(3) 分类号：Q523 R457.1+2 关键词：DNA,基因组   析出法   滤膜法  

篇6：猪肝脏基因组DNA提取与纯化的研究

猪肝脏基因组DNA提取与纯化的研究

对血液中提取基因组DNA的方法加以改进,获得了一种提取猪肝脏组织中DNA的.有效方法.试验表明,利用SDS裂解,氯仿、异戊醇抽提母猪肝脏中基因组DNA,得到了纯度较高的DNA.

作 者：韩芬霞 HAN Fen-xia  作者单位：河南科技学院动物科技学院,河南,新乡,453003 刊 名：安徽农业科学  ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES 年，卷(期)： 34(16) 分类号：Q781 关键词：母猪   肝脏   基因组DNA   提取  

篇7：基于CTAB法提取毛竹基因组DNA的探讨

基于CTAB法提取毛竹基因组DNA的探讨

应用CTAB法、改良CTAB法、改良CTAB-高盐沉淀法对毛竹基因组DNA进行了提取,并用紫外分光光度计(UV3300)、琼脂糖凝胶电泳和PCR分析对提取的DNA进行了检测,对DNA的产量、质量、PCR效果等方面进行了综合比较.结果表明:改良CTAB-高盐沉淀法是提取高质量毛竹基因组DNA的较好方法.

作 者：高志民 范少辉 高健 李雪平蔡春菊 彭镇华 GAO Zhi-min FAN Shao-hui GAO jian LI Xue-ping CAI Chun-ju PENG Zhen-hua  作者单位：高志民,范少辉,高健,李雪平,蔡春菊,GAO Zhi-min,FAN Shao-hui,GAO jian,LI Xue-ping,CAI Chun-ju(国际竹藤网络中心,国家林业局竹藤科学与技术重点开放实验室,北京,100102)

彭镇华,PENG Zhen-hua(中国林业科学研究院林业研究所,北京,100091)

刊 名：林业科学研究  ISTIC PKU英文刊名：FOREST RESEARCH 年，卷(期)：2006 19(6) 分类号：S795 关键词：毛竹   基因组DNA   CTAB法  

篇8：龙眼基因组DNA提取及RAPD反应体系优化的研究

龙眼基因组DNA提取及RAPD反应体系优化的研究

采用改良CTAB法提取龙眼幼叶基因组DNA,并以其为模板对影响RAPD扩增反应的主要因子采用单因素递进分析方法进行优化,建立了龙眼基因组DNA最佳RAPD反应体系,即在2μL的反应体积中,含20ng模板,1.0 U Taq DNA聚合酶,2.0 mmol/L MgCl2,各0.20 mmol/L dNTP,0.20 μmol/L引物.

作 者：肖璇 孙一铭 王心燕 乔爱民 孙敏 XIAO Xuan SUN Yi-ming WANG Xin-yan QIAO Ai-min SUN Min  作者单位：肖璇,XIAO Xuan(赣南师范学院,化学与生命科学系,江西,赣州,341000;西南大学,生命科学学院,重庆,400715)

孙一铭,孙敏,SUN Yi-ming,SUN Min(西南大学,生命科学学院,重庆,400715)

王心燕,乔爱民,WANG Xin-yan,QIAO Ai-min(仲恺农业技术学院,园艺系,广州,510225)

刊 名：西南师范大学学报（自然科学版）  ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF SOUTHWEST CHINA NORMAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION) 年，卷(期)： 31(2) 分类号：Q946 关键词：龙眼   基因组DNA   DNA分子标记技术  

篇9：DNA-AFLP分析用辣椒基因组DNA提取方法的优化

DNA-AFLP分析用辣椒基因组DNA提取方法的优化

采用SDS法、CTAB-1法和CTAB-2法提取辣椒(Capsicum annuum)叶片DNA,通过紫外吸收和琼脂糖凝胶电泳检测,证明CTAB-2法所提取DNA的`质量和纯度较高;以此DNA为模板进行DNA-AFLP分析,特征条带清晰、基本无脱尾,适用于DNA-AFLP等分子生物学研究.

作 者：向 宋小丽 施倩倩 柴伟国 曹家树 XIANG Xun SONG Xiao-li SHI Qian-qian CAI Wei-guo CAO Jia-shu  作者单位：向,宋小丽,施倩倩,曹家树,XIANG Xun,SONG Xiao-li,SHI Qian-qian,CAO Jia-shu(浙江大学农业与生物技术学院,农业部“园艺植物生长发育与品质调控”重点开放实验室,浙江,杭州,310029)

柴伟国,CAI Wei-guo(浙江省杭州市农业科学研究院,浙江,杭州,310024)

刊 名：长江大学学报（自科版）农学卷 英文刊名：JOURNAL OF YANGTZE UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION) 年，卷(期)： 6(2) 分类号：Q785 关键词：CTAB   辣椒(Capsicum   annuum)   DNA   DNA-AFLP  

篇10：不同方式保存的蜘蛛基因组DNA提取方法的探索

不同方式保存的蜘蛛基因组DNA提取方法的探索

基因组DNA的提取是在分子水平上进行研究的基础,提取的DNA的.纯度、浓度及结构的完整性是进行基因工程各项研究的前提条件.本文用SDS法、CTAB法和饱和Nac1法等3种方法分别对75%乙醇浸泡、无水乙醇浸泡、-20℃冷冻及新鲜蜘蛛标本基因组DNA进行提取,并进行比较.实验结果表明:使用SDS法提取-20℃冷冻保藏的蜘蛛标本基因组DNA,可以达到分子生物学研究的要求.

作 者：卢晓亮 唐贵明 张慧 赵娜娜 LU Xiao-Liang TANG Gui-Ming ZHANG Hui ZHAO Na-Na  作者单位：内蒙古师范大学生命科学与技术学院,呼和浩特,010022 刊 名：蛛形学报 英文刊名：ACTA ARACHNOLOGICA SINICA 年，卷(期)：2009 18(2) 分类号：Q96 关键词：蜘蛛   保存方式   基因组DNA   DNA提取  

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