抗双氯青霉素单克隆抗体的制备与初步鉴定
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篇1：抗双氯青霉素单克隆抗体的制备与初步鉴定
抗双氯青霉素单克隆抗体的制备与初步鉴定
采用碳化二亚胺法,将双氯青霉素(dicloxacillin)与牛血清白蛋白偶联制备免疫原,免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠的`脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,间接ELISA筛选,阳性杂交瘤细胞用有限稀释法克隆,获得1株可稳定分泌McAb的杂交瘤细胞5D4-C9-C8;间接ELISA方法测定,其细胞上清抗体效价为1:300,腹水效价为1:3.5×105,为IgG1,与其结构类似物邻氯青霉素、苯唑青霉素的交叉反应率分别为17.6%和26.1%,与苄青霉素、羟氨苄青霉素和氨苄青霉素均无交叉反应性.体外传代培养和冻存复苏后抗体分泌稳定.为进一步研制检测双氯青霉素的ELISA试剂盒奠定了基础.
作 者：王琳 齐孟文 冯才伟 孟丽丽 WANG Lin QI Meng-wen FENG Cai-wei MENG Li-li 作者单位：中国农业大学,北京,100094 刊 名：中国预防兽医学报 ISTIC PKU英文刊名：CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE 年，卷(期)： 28(5) 分类号：Q819 关键词：β-内酰胺抗生素 双氯青霉素 单克隆抗体篇2：邻氯青霉素单克隆抗体的制备及特性鉴定
邻氯青霉素单克隆抗体的制备及特性鉴定
采用碳化二亚胺法,将邻氯青霉素(cloxacillin)与牛血清白蛋白偶联制备免疫原,免疫BALB/c小鼠,经杂交瘤技术获得了一株能稳定分泌抗邻氯青霉素单克隆抗体的杂交瘤细胞株2H8-B1-F4.间接ELISA方法测定,抗体亚类为IgG1,其细胞上清抗体效价为1:1000,腹水效价为1:4×105.与其结构类似物苯唑青霉素、双氯青霉素的.交叉反应率为21.3%和19.6%,和氨苄青霉素、羟氨苄青霉素和苄青霉素无交叉反应.体外传代培养和冻存复苏后抗体分泌稳定.为进一步研制检测邻氯青霉素的ELISA试剂盒奠定基础.
作 者：王琳 齐孟文 冯才伟 孟丽丽 WANG Lin QI Meng-wen FENG Cai-wei MENG Li-li 作者单位：中国农业大学生物物理系,北京,100094 刊 名：中国生物工程杂志 ISTIC PKU英文刊名：CHINA BIOTECHNOLOGY 年，卷(期)：2006 26(2) 分类号：Q819 关键词：β-内酰胺抗生素 双氯青霉素 单克隆抗体篇3：牛干扰素单克隆抗体的制备与初步鉴定
牛干扰素单克隆抗体的制备与初步鉴定
通过IPTG诱导的`大肠埃希菌表达重组牛干扰素-γ融合蛋白(BovIFN-γ),利用Glutathione Sepharose 4 Fast Flow亲和层析柱进行融合蛋白的纯化,纯化后的融合蛋白BovIFN-γ作为抗原免疫Balb/c小鼠,经5次免疫后,取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,间接ELISA筛选,有限稀释法克隆亚克隆获得分泌BovIFN-γ单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并通过ELISA方法对其抗体效价、特异性、亚类及稳定性进行鉴定.获得一株稳定分泌BovIFN-γ单克隆抗体的杂交瘤细胞株A12E9,细胞培养上清和腹水效价可达1∶3 200和1∶160 000.
作 者：李超 林祥梅 余多慰 李全芬 李桂芬 韩雪清 作者单位：李超,余多慰,李全芬(南京师范大学生命科学学院,江苏南京,210046)林祥梅,李桂芬,韩雪清(中国检验检疫科学研究院,北京,100029)
刊 名：动物医学进展 PKU英文刊名：PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE 年，卷(期)： 31(4) 分类号：S852.43 关键词：牛γ干扰素 单克隆抗体 鉴定篇4：抗IBDV VP2单克隆抗体制备及其免疫学鉴定
抗IBDV VP2单克隆抗体制备及其免疫学鉴定
采用不连续蔗糖密度梯度离心法纯化的鸡传染性法氏囊病病毒弱毒Gt株,并与Tj强毒株共同免疫BALB/c小鼠.利用淋巴细胞杂交瘤技术,取其脾细胞与SP2/0 骨髓瘤细胞进行融合, 经过3次筛选克隆, 获得8株具有分泌抗IBDV抗体的杂交瘤细胞系,并对8株单抗进行了分子生物学及免疫学方面的鉴定.间接ELISA显示获得的'8株单抗只与IBDV有特异性的反应,Western-blotting表明,部分单抗能够特异地与Sf9细胞表达的VP2蛋白反应;中和试验表明8株单抗均具有中和活性,而且有3株中和效价在26以上.研究推测,8株单抗中有2株针对的表位为构象依赖性,其余6株单抗所针对的为线性中和性表位.
作 者：程宇 高宏雷 高玉龙 简子健 余嘉玲 王晓燕 王笑梅 CHENG Yu GAO Hong-lei GAO Yu-long JIAN Zi-jian YU Jia-ling WANG Xiao-yan WANG Xiao-mei 作者单位：程宇,CHENG Yu(中国农业科学院,哈尔滨兽医研究所,哈尔滨,150001;新疆农业大学,动物医学院,乌鲁木齐,830052)高宏雷,高玉龙,王晓燕,王笑梅,GAO Hong-lei,GAO Yu-long,WANG Xiao-yan,WANG Xiao-mei(中国农业科学院,哈尔滨兽医研究所,哈尔滨,150001)
简子健,余嘉玲,JIAN Zi-jian,YU Jia-ling(新疆农业大学,动物医学院,乌鲁木齐,830052)
刊 名：新疆农业大学学报 ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF XINJIANG AGRICULTURAL UNIVERSITY 年，卷(期)： 29(2) 分类号：Q785 关键词：传染性法氏囊病病毒 单克隆抗体 中和活性篇5：抗幽门螺杆菌单克隆抗体的制备与鉴定
抗幽门螺杆菌单克隆抗体的制备与鉴定
目的制备抗幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)全菌的单克隆抗体并对其特异性进行初步鉴定.方法用培养的`幽门螺杆菌超声破菌后的上清和沉淀为抗原分别免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术制备单克隆抗体并测定抗体免疫球蛋白亚类、效价及亲和力,用重组表达的Hp Lpp20、HspA、urease A、CagA、urease B、catalase蛋白鉴定抗体.结果共获得34株抗Hp的单克隆抗体,其中抗上清31株和抗沉淀3株,34株抗体中针对Lpp20、HspA、urease A、CagA、ureaseB、catalase蛋白的抗体分别为3、2、4、1、5、2株,目前已鉴定的部分单克隆抗体的亚类均为IgG1,细胞培养上清的效价为1:16～1:32,腹水效价为1:3～1:64000,抗体亲和常数介于1×10-10 mol/L～5.2×10-12mol/L.结论获得特异性针对幽门螺杆菌的单克隆抗体,为幽门螺杆菌的诊断和疫苗研究奠定基础.
作 者：李妍 宁云山 洪燕华 刘宜楚 罗军 龙敏 董文其 李明 LI Yan NING Yun-shan HONG Yan-hua LIU Yi-chu LUO Jun LONG Min DONG Wen-qi LI Ming 作者单位：李妍,宁云山,洪燕华,刘宜楚,董文其,李明,LI Yan,NING Yun-shan,HONG Yan-hua,LIU Yi-chu,DONG Wen-qi,LI Ming(南方医科大学,生物技术学院,广东,广州,510515)罗军,龙敏,LUO Jun,LONG Min(南方医科大学,公共卫生与热带病学院微生物系,广东,广州,510515)
刊 名：南方医科大学学报 ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 年，卷(期)：2006 26(4) 分类号：Q813.2 关键词：幽门螺杆菌 单克隆抗体 疫苗 杂交瘤技术篇6：抗鸡γ-干扰素单克隆抗体的研制及初步鉴定
抗鸡γ-干扰素单克隆抗体的研制及初步鉴定
目的: 制备抗鸡γ-干扰素单克隆抗体(mAb).方法: 应用淋巴细胞杂交瘤技术,以重组菌BL21(DE3)(pET-ChIFN-γ)表达产物的包涵体作为抗原免疫BALB/c鼠,以纯化的GST-ChIFN-γ作为检测抗原,制备抗鸡γ-干扰素mAb;采用ELISA、Dot-ELISA和Western blot鉴定mAb的特异性.结果: 获得2株可稳定分泌抗鸡γ-干扰素mAb的`杂交瘤细胞株1G5、5E3,其Ig亚类均为IgG2a,腹水mAb 1G5、5E3的ELISA效价分别为1:1 600 000,1:120 000.在Dot-ELISA试验中,这2株mAb均只与表达His-ChIFN-γ及GST-ChIFN-γ的重组大肠杆菌反应,与未表达这2种IFN-γ的其他8种菌株均不发生反应.在蛋白质印迹试验中,2株mAb均能与融合蛋白GST-ChIFN-γ、His-ChIFN-γ发生反应,出现特异性条带.结果表明,mAb 1G5、5E3是针对鸡γ-干扰素的特异性mAb.结论: 成功地制备抗鸡γ-干扰素的mAb,它们在免疫检测、免疫细胞功能分析和免疫调节研究等方面有应用价值.
作 者：戴华 焦新安 潘志明 黄金林 胡茂志 唐伟 刘秀梵 DAI Hua JIAO Xin-an PAN Zhi-ming HUANG Jin-lin HU Mao-zhi TANG Wei LIU Xiu-fan 作者单位：扬州大学,农业部畜禽传染病学重点开放实验室,江苏,扬州,225009 刊 名：细胞与分子免疫学杂志 ISTIC PKU英文刊名：CHINESE JOURNAL OF CELLULAR AND MOLECULAR IMMUNOLOGY 年，卷(期)： 22(4) 分类号：Q813.2 关键词：鸡γ-干扰素(ChIFN-γ) 单克隆抗体篇7：抗盐酸克伦特罗单克隆抗体的制备和鉴定
抗盐酸克伦特罗单克隆抗体的制备和鉴定
以重氮反应将盐酸克伦特罗与牛血清白蛋白、鸡卵清蛋白偶联制备免疫原和检测原,通过杂交瘤技术获得了3株能分泌特异结合CL小分子的抗体杂交瘤细胞株.经竞争法ELISA分析,9E3抗体的IC50质量浓度为19.85μg/L,14C5抗体为1.65μg/L,16F4抗体为0.84μg/L.在与类似物的交叉性反应中,16F4抗体与沙丁胺醇的交叉反应性为0.26%,特布他林为0.04%,与非诺特罗、肾上腺素、去甲肾上腺素的.交叉反应性都小于0.02%.因此,所制备的抗盐酸克伦特罗的抗体的特异性高,可用于与其相关的免疫检测研究和应用.
作 者：吕琦 张爱玲 王泽华 马岚 LV Qi ZHANG Ai-ling WANG Ze-hua MA Lan 作者单位：吕琦,王泽华,马岚,LV Qi,WANG Ze-hua,MA Lan(云南大学,单克隆抗体工程技术中心,云南,昆明,650091)张爱玲,ZHANG Ai-ling(云南中医学院,云南,昆明,650032)
刊 名：云南大学学报（自然科学版） ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF YUNNAN UNIVERSITY(NATURAL SCIENCES EDITION) 年，卷(期)：2006 28(1) 分类号：Q813.2 关键词：盐酸克伦特罗 单克隆抗体 竞争法ELISA β-激动剂 残留【抗双氯青霉素单克隆抗体的制备与初步鉴定】相关文章：
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