氯霉素多克隆抗体的制备及其免疫学特性鉴定
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篇1：氯霉素多克隆抗体的制备及其免疫学特性鉴定
氯霉素多克隆抗体的制备及其免疫学特性鉴定
将氯霉素(CAP)进行化学修饰引入羧基活性基团,合成具有半抗原结构特征的氯霉素半琥珀酸酯(CAP-HS);采用混合酸酐(MA)法将CAP-HS与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联合成人工免疫原BSA-CAP-HS和包被原OVA-CAP-HS,用红外(IR)、紫外(UV)、凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定;用BSA-CAP-HS免疫新西兰白兔和SPF鸡制备多克隆抗体(pAb),间接ELISA测定其效价,阻断ELISA鉴定其敏感性,琼脂双扩散试验、WestGold膜杂交试验和交叉反应试验鉴定其特异性.结果表明,BSA-CAP-HS偶联成功,其分子结合比为15.6:1,获得了高价、敏感、特异的CAP pAb,为CAP残留免疫学检测方法的建立奠定了基础.
作 者：王自良 张海棠 王艳荣 刘俊伟 吴玉平柴书军 张改平Wang Ziliang Zhang Haitang Wang Yanrong Liu Junwei Wu Yuping Chai Shujun Zhang Gaiping 作者单位：王自良,张海棠,王艳荣,刘俊伟,吴玉平,Wang Ziliang,Zhang Haitang,Wang Yanrong,Liu Junwei,Wu Yuping(河南科技学院动物科学学院,河南,新乡,453003)柴书军,张改平,Chai Shujun,Zhang Gaiping(河南省动物免疫学重点实验室,河南 郑州 450002)
刊 名：中国农学通报 ISTIC PKU英文刊名：CHINESE AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN 年，卷(期)： 22(6) 分类号：S8 关键词：氯霉素 半抗原 人工免疫原 多克隆抗体 免疫学特性篇2：抗IBDV VP2单克隆抗体制备及其免疫学鉴定
抗IBDV VP2单克隆抗体制备及其免疫学鉴定
采用不连续蔗糖密度梯度离心法纯化的鸡传染性法氏囊病病毒弱毒Gt株,并与Tj强毒株共同免疫BALB/c小鼠.利用淋巴细胞杂交瘤技术,取其脾细胞与SP2/0 骨髓瘤细胞进行融合, 经过3次筛选克隆, 获得8株具有分泌抗IBDV抗体的杂交瘤细胞系,并对8株单抗进行了分子生物学及免疫学方面的鉴定.间接ELISA显示获得的'8株单抗只与IBDV有特异性的反应,Western-blotting表明,部分单抗能够特异地与Sf9细胞表达的VP2蛋白反应;中和试验表明8株单抗均具有中和活性,而且有3株中和效价在26以上.研究推测,8株单抗中有2株针对的表位为构象依赖性,其余6株单抗所针对的为线性中和性表位.
作 者：程宇 高宏雷 高玉龙 简子健 余嘉玲 王晓燕 王笑梅 CHENG Yu GAO Hong-lei GAO Yu-long JIAN Zi-jian YU Jia-ling WANG Xiao-yan WANG Xiao-mei 作者单位：程宇,CHENG Yu(中国农业科学院,哈尔滨兽医研究所,哈尔滨,150001;新疆农业大学,动物医学院,乌鲁木齐,830052)高宏雷,高玉龙,王晓燕,王笑梅,GAO Hong-lei,GAO Yu-long,WANG Xiao-yan,WANG Xiao-mei(中国农业科学院,哈尔滨兽医研究所,哈尔滨,150001)
简子健,余嘉玲,JIAN Zi-jian,YU Jia-ling(新疆农业大学,动物医学院,乌鲁木齐,830052)
刊 名：新疆农业大学学报 ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF XINJIANG AGRICULTURAL UNIVERSITY 年，卷(期)：2006 29(2) 分类号：Q785 关键词：传染性法氏囊病病毒 单克隆抗体 中和活性篇3：碘化酪蛋白多克隆抗体的制备
碘化酪蛋白多克隆抗体的制备
碘化酪蛋白(Iodinatde Casein)是一种蛋白同化类激素,为甲状腺素的前驱物质,具有类似甲状腺素的生理作用[1-3].被农业部第176号公告列入禁止在饲料和动物饮用水中使用的药物[4].
作 者：朱宇 杨曙明 于洪侠 ZHU yu YANG Shu-ming YU Hong-xia 作者单位：朱宇,ZHU yu(四川省农业科学院实验场,成都,610066)杨曙明,于洪侠,YANG Shu-ming,YU Hong-xia(中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所,北京,100081)
刊 名：四川大学学报（自然科学版） ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF SICHUAN UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION) 年，卷(期)： 43(6) 分类号：Q5 关键词：篇4：邻氯青霉素单克隆抗体的制备及特性鉴定
邻氯青霉素单克隆抗体的制备及特性鉴定
采用碳化二亚胺法,将邻氯青霉素(cloxacillin)与牛血清白蛋白偶联制备免疫原,免疫BALB/c小鼠,经杂交瘤技术获得了一株能稳定分泌抗邻氯青霉素单克隆抗体的杂交瘤细胞株2H8-B1-F4.间接ELISA方法测定,抗体亚类为IgG1,其细胞上清抗体效价为1:1000,腹水效价为1:4×105.与其结构类似物苯唑青霉素、双氯青霉素的.交叉反应率为21.3%和19.6%,和氨苄青霉素、羟氨苄青霉素和苄青霉素无交叉反应.体外传代培养和冻存复苏后抗体分泌稳定.为进一步研制检测邻氯青霉素的ELISA试剂盒奠定基础.
作 者：王琳 齐孟文 冯才伟 孟丽丽 WANG Lin QI Meng-wen FENG Cai-wei MENG Li-li 作者单位：中国农业大学生物物理系,北京,100094 刊 名：中国生物工程杂志 ISTIC PKU英文刊名：CHINA BIOTECHNOLOGY 年，卷(期)：2006 26(2) 分类号：Q819 关键词：β-内酰胺抗生素 双氯青霉素 单克隆抗体篇5：磺胺二甲嘧啶单克隆抗体的制备及特性鉴定
磺胺二甲嘧啶单克隆抗体的制备及特性鉴定
采用重氮化法合成磺胺二甲嘧啶(SM2)-人血清白蛋白(HSA)免疫抗原和SM2-卵清白蛋白(OVA)包被抗原.经紫外光谱扫描法确认SM2与载体蛋白偶联成功;经计算SM2与HSA、OVA的结合比分别为9:1和15:1.利用杂交瘤技术和有限稀释法经过5次亚克隆,得到三株特异性稳定分泌SM2抗体的.杂交瘤细胞,经鉴定该单克隆抗体免疫球蛋白亚类为IgG1,为入链,分子量为162 Ku,染色体数目90条左右,亲和常数为6.1×1012 M-1.与其他四种磺胺药和两种载体蛋白HSA、OVA均无交叉反应.
作 者：丁良君 李继昌 周艳君 付锐 霍贵成 张东玲 DING Liang-jun LI Ji-chang ZHOU Yan-jun FU Rui HUO Gui-cheng ZHANG Dong-ling 作者单位：丁良君,李继昌,霍贵成,张东玲,DING Liang-jun,LI Ji-chang,HUO Gui-cheng,ZHANG Dong-ling(东北农业大学,动物医学院,黑龙江,哈尔滨,150030)周艳君,ZHOU Yan-jun(中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001)
付锐,FU Rui(伊春市金山屯区林业医院,黑龙江,伊春,1500263)
刊 名：中国预防兽医学报 ISTIC PKU英文刊名：CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE 年，卷(期)： 28(6) 分类号：Q785 关键词：磺胺二甲嘧啶 单克隆抗体 酶联免疫吸附实验篇6：抗果蝇Dnop5蛋白抗体的制备及其特性鉴定
抗果蝇Dnop5蛋白抗体的制备及其特性鉴定
目的:制备兔抗果蝇Dnop5蛋白的抗体,并进行特性鉴定.方法:以RT-PCR扩增Dnop5的全长cDNA并克隆入pET28a(+)表达载体中,表达并纯化Dnop5-His融合蛋白.用纯化的Dnop5-His融合蛋白免疫家兔,制备抗Dnop5的抗体,并用His亲和层析法进行纯化.采用Western blot法和免疫组化染色法鉴定该抗体的特异性及生物学活性.结果:表达的Dnop5-His蛋白以包涵体的形式存在,用His亲和层析法分离纯化后得到较纯的Dnop5-His融合蛋白,以纯化的Dnop5-His免疫家兔制备的`兔抗Dnop5的抗体,经Western blot分析显示:该抗体可与果蝇的胚胎、幼虫、蛹及成虫组织中表达的Dnop5特异性结合.结论:获得具有良好特异性的兔抗dnop5抗体,为进一步研究Dnop5的功能奠定了基础.
作 者：袁榴娣 张燕 万永奇 丁洁 YUAN Liu-di ZHANG Yan WAN Yong-qi DING Jie 作者单位：东南大学基础医学院,教育部发育与疾病相关基因重点实验室,江苏,南京,210009 刊 名：细胞与分子免疫学杂志 ISTIC PKU英文刊名：CHINESE JOURNAL OF CELLULAR AND MOLECULAR IMMUNOLOGY 年，卷(期)：2006 22(5) 分类号：Q786 关键词：果蝇 Nop/Sik家族 Dnop5基因 原核表达 抗体制备篇7：RH株弓形虫抗原及高效价多克隆抗体的制备
RH株弓形虫抗原及高效价多克隆抗体的制备
通过制备和分析弓形虫抗原蛋白,并以此抗原制备高效价的兔抗弓形虫多克隆抗体,为弓形虫的免疫检测和诊断提供有效的方法和途径,同时也为基因工程产物的鉴定提供方便有效的检测手段.速殖子主要来源于感染后72～74 h获得的腹水,通过常规方法制备和提纯弓形虫可溶性抗原,采用SDS-AGE方法分析抗原蛋白的分子量.以抗原和福氏佐剂制备成完全和不完全福氏佐剂通过脊柱两旁皮下多点免疫的途径免疫新西兰大白兔,制备兔抗弓形体多克隆抗体,间接ELISA法检测血清中抗体的效价.经过观察所获得的`虫体阶段主要处在宿主细胞巨噬细胞内而尚未逸出阶段,通过对结果的分析,所制备的弓形体抗原的分子量主要集中在17～156 ku之间,与文献报道有差异,兔抗弓形体抗体效价在60 000以上.该研究结果将为弓形体的蛋白质研究,免疫诊断、预防及有效治疗奠定基础.
作 者：陈美 周克夫 赵卿 李鹰 林宇光 洪凌仙 CHEN Mei ZHOU Ke-fu ZHAO Qing LI Ying LING Yu-guang HONG Ling-xian 作者单位：厦门大学生命科学学院,细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室,福建,厦门,361005 刊 名：厦门大学学报（自然科学版） ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF XIAMEN UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE) 年，卷(期)： 45(5) 分类号：Q18 关键词：弓形虫抗原 多克隆抗体 SDS-PAGE ELISA篇8：家蚕丝素轻链蛋白多克隆抗体的制备及应用
家蚕丝素轻链蛋白多克隆抗体的制备及应用
本研究通过用回收纯化的Fib-L蛋白为抗原免疫家兔,获得多克隆抗体,通过与家蚕大造5龄5d的10个不同组织进行Western blot,结果表明,制备的Fib-L抗体能识别在后部丝腺特异合成的Fib-L蛋白,表明该抗体有较好的特异性.利用此抗体进行丝腺组织的免疫组化,经抗体的一系列的`梯度稀释和条件探索,发现当Fib-L一抗在1∶50和荧光二抗1∶1000的条件下得到理想的免疫组化结果,在荧光显微镜下观察到了二抗标记的绿色荧光.以上结果显示,本实验成功制得Fib-L 蛋白抗体,获得丝腺组织免疫组化的一些重要参考信息,为家蚕丝腺功能基因的研究及细胞定位提供了一定的参考价值.
作 者：刘春 韩宇 荣海博 侯勇 陈玉琳 高志宏 夏庆友 LIU Chun HAN Yu RONG Hai-bo HOU Yong CHENG Yu-lin GAO Zhi-hong XIA Qing-you 作者单位：西南大学蚕学与系统生物学研究所,重庆,400716 刊 名：蚕学通讯 英文刊名：NEWSLETTER OF SERICULTURAL SCIENCE 年，卷(期)： 29(1) 分类号：S8 关键词：丝素基因 Fib-L蛋白 多克隆抗体 Western blot 免疫组化篇9：HBV前S2蛋白单克隆抗体的制备和生物学特性的鉴定
HBV前S2蛋白单克隆抗体的制备和生物学特性的鉴定
目的`克隆表达HBV前S2蛋白,用纯化的重组蛋白GST-S2免疫BALB/C小鼠,通过杂交瘤技术制备抗HBV前S2蛋白的单克隆抗体(mAb),并鉴定其特性.方法利用含双拷贝乙肝病毒adw2亚型基因全序列的质粒pEcob6,经PCR方法扩增出HBV前S2片段,在GST表达系统中表达,表达产物用谷胱甘肽亲和层析纯化后,用于免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗前S2蛋白的mAb,采用间接ELISA方法和Western blot进行mAb特异性鉴定;同时采用间接ELISA方法鉴定mAb相对亲和力.结果获得一株可分泌特异性mAb的杂交瘤细胞7A6;相对亲和力均在107以上.Western blot显示该株mAb能特异识别重组前S2蛋白.结论成功地制备出抗HBV前S2蛋白的一株mAb.
作 者：赖梅梅 王雪梅 张君 蔡雪飞 郑健 黄爱龙 Lai Meimei Wang Xuemei Zhang Jun Cai Xuefei Zheng Jian Huang Ailong 作者单位：重庆医科大学附属第二医院病毒性肝炎研究所,感染性疾病分子生物学教育部重点实验室,重庆,400016 刊 名：生物技术通报 PKU英文刊名：BIOTECHNOLOGY BULLETIN 年，卷(期)： “”(3) 分类号：Q5 关键词：乙肝病毒 前S2蛋白 单克隆抗体 生物学特性篇10：抗苯巴比妥单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及其免疫学特性鉴定
抗苯巴比妥单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及其免疫学特性鉴定
苯巴比妥(PB)经化学修饰在其苯环上引入活性基团氨基,合成半抗原对氨基苯巴比妥(pAPB),用重氮化法将pAPB偶联于BSA,合成人工抗原BSA-pAPB,并用红外(IR)、紫外(UV)、SDS-PAGE鉴定;用BSA-pAPB免疫Balb/C小鼠,细胞融合技术建立抗PB的单克隆抗体mAb(PB mAb)杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备PB mAb,并鉴定其免疫学特性.结果表明,BSA-pAPB偶联成功,偶联率为1:19;筛选出1B9、3C4、3F6、4E6共4株杂交瘤细胞,其中最好的4E6株间接ELISA效价细胞培养上清为1:8.1×102,腹水为1:6.4×105,同种型为IgG1/κ,亲和常数(Ka)为2.08×1010L/mol,对PB的半数抑制浓度(IC50)为11.35μg/L,与巴比妥的'交叉反应率(CR%)为12.4%,与其他化合物无CR.本试验研制出高效价、敏感、特异的PB mAb,可用于PB残留检测的免疫学实验.
作 者：王自良 张改平杨艳艳 张海棠 王选年 邓瑞广 WANG Zi-liang ZHANG Gai-ping YANG Yan-yan ZHANG Hai-tang WANG Xuan-nian DENG Rui-guang 作者单位：王自良,张海棠,王选年,WANG Zi-liang,ZHANG Hai-tang,WANG Xuan-nian(河南科技学院动物科学学院,河南,新乡,453003)张改平,杨艳艳,邓瑞广,ZHANG Gai-ping,YANG Yan-yan,DENG Rui-guang(河南省动物免疫学重点实验室,河南,郑州,450002)
刊 名：核农学报 ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF NUCLEAR AGRICULTURAL SCIENCES 年，卷(期)：2006 20(4) 分类号：Q94 关键词：苯巴比妥 半抗原 人工抗原 单克隆抗体 免疫学特性【氯霉素多克隆抗体的制备及其免疫学特性鉴定】相关文章：
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