H5N1亚型禽流感病毒M2的修饰表达及其免疫原性分析
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篇1：H5N1亚型禽流感病毒M2的修饰表达及其免疫原性分析
H5N1亚型禽流感病毒M2的修饰表达及其免疫原性分析
禽流感的发生不仅会造成禽类的'大量死亡,而且也严重地威胁着人类健康,接种疫苗是控制禽流感发生的主要措施之一.M2基因的保守性使其成为基因工程亚单位疫苗的目标抗原.本研究将M2基因的跨膜区删除后,构建原核表达载体pET32a-△M2,IPTG诱导后,收获的细菌总蛋白SDS-PAGE电泳结果表明修饰的M2基因在原核表达系统中得到高效表达,表达蛋白以可溶性形式存在,Western杂交和动物免疫结果表明重组蛋白具有抗原性和免疫原性.本研究结果为利用M2重组蛋白开发具有交叉保护作用的禽流感疫苗奠定了基础.
作 者：张国广 邹金美 张辉煌 董美 陈亮 ZHANG Guo-guang ZOU Jin-mei ZHANG Hui-huang DONG Mei CHEN Liang 作者单位：张国广,ZHANG Guo-guang(漳州师范学院,生物科学与技术系,福建,漳州,363000;厦门大学,生命科学学院,福建,厦门,361005)邹金美,ZOU Jin-mei(漳州师范学院,生物科学与技术系,福建,漳州,363000)
张辉煌,董美,陈亮,ZHANG Hui-huang,DONG Mei,CHEN Liang(厦门大学,生命科学学院,福建,厦门,361005)
刊 名：漳州师范学院学报（自然科学版） 英文刊名：JOURNAL OF ZHANGZHOU TEACHERS COLLEGE(NATURAL SCIENCE EDITION) 年，卷(期)： 22(3) 分类号：Q939.47 S852.65+9.5 关键词：禽流感病毒 M2基因 抗原性篇2：H5N1亚型禽流感病毒NS1基因在昆虫细胞中的表达
H5N1亚型禽流感病毒NS1基因在昆虫细胞中的表达
将H5N1亚型禽流感病毒(AIV)NS1基因插入到杆状病毒转移载体pFastBac1中,获得重组转移载体pFastBac1-NS1.将pFastBac1-NS1转化到DH10Bac感受态细胞中,筛选到重组转座子rBacmid-NS1.在脂质体转染试剂介导下将rBacmid-NS1转染对数生长期的Sf 9昆虫细胞获得重组杆状病毒rBV-NS1.rBV-NS1感染Sf 9细胞后,通过SDS-PAGE、Western blot和ELISA分析表明:获得了分子量为26kDa的特异性NS1蛋白;并且该蛋白可与H5N1 AIV攻毒鸭的'血清发生特异性免疫反应,而不能与H5N1AIV灭活疫苗免疫鸭的血清发生反应.试验结果表明:NS1在Sf9昆虫细胞中获得了高效表达,具有与天然蛋白相似的免疫活性,并可以作为区分免疫及自然感染个体的鉴别诊断抗原,为建立禽流感病毒自然感染家禽与禽流感灭活疫苗免疫家禽的鉴别诊断方法奠定了基础.
作 者：刘春国 刘明 张云 杨涛 LIU Chun-guo LIU Ming ZHANG Yun YANG Tao 作者单位：刘春国,刘明,张云,LIU Chun-guo,LIU Ming,ZHANG Yun(中国农业科学院,哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,哈尔滨,150001)杨涛,YANG Tao(沈阳农业大学,沈阳,110161)
刊 名：中国生物工程杂志 ISTIC PKU英文刊名：CHINA BIOTECHNOLOGY 年，卷(期)： 26(6) 分类号：Q96 关键词：AIV H5N1 NS1 杆状病毒表达 鉴别抗原篇3：H5N1型禽流感病毒HA基因在烟草中的表达
H5N1型禽流感病毒HA基因在烟草中的表达
禽流感病毒H5N1是可以直接感染人类的甲型流感病毒,发展植物源口服疫苗是疫苗研究的方向之一.本研究通过农杆菌介导的方法将禽流感病毒H5N1的HA基因转化烟草.共获得38株潮霉素抗性植株,经PCR和Southern-blotting检测,目的基因已整合到转基因植株的基因组中.Western-dotting检测结果表明,目的'基因在转基因烟草中得到表达,具有免疫原性,获得了能够表达HA基因的植物口服疫苗候选植株.
作 者：郭小玲 崔红 王宇 张国广 陈亮 GUO Xiao-ling CUI Hong WANG Yu ZHANG Guo-guang CHEN Liang 作者单位：郭小玲,GUO Xiao-ling(厦门大学海洋与环境学院,福建,厦门,361005)崔红,CUI Hong(河南农业大学国家烟草栽培生理生化基地,河南,郑州,450000)
王宇,张国广,陈亮,WANG Yu,ZHANG Guo-guang,CHEN Liang(厦门大学生命科学学院,福建,厦门,361005)
刊 名：厦门大学学报（自然科学版） ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF XIAMEN UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE) 年，卷(期)：2006 45(z1) 分类号：Q943.2 关键词：禽流感病毒 H5N1 烟草 转基因篇4：一株H5N2亚型鹦鹉源禽流感病毒的分离鉴定
一株H5N2亚型鹦鹉源禽流感病毒的分离鉴定
在广东进行流行病学调查时从鹦鹉采集的拭子样本中分离到一株禽流感病毒,应用聚合酶链反应(PCR)、血凝抑制试验(HI)和基因测序等方法技术对其进行了亚型鉴定.结果表明,此分离株具有血凝活性,且被H5亚型禽流感病毒标准阳性血清特异性抑制;分别用针对禽流感病毒的M、H5亚型禽流感病毒的HA基因、N2亚型禽流感病毒的NA基因特异性鉴定引物对该分离株进行PCR扩增,均扩增出特异性目的'片段;测序及BLAST分析表明其与H5N2亚型禽流感美国分离株的HA基因和NA基因核苷酸序列相似性高达97%以上,由此该分离株鉴定为H5N2亚型禽流感病毒,并命名为A/Parrot/Guangdong/268/.
作 者：单芬 廖明 焦培荣 徐成刚 韦良孟 罗开健 樊惠英 曹伟胜 亓文宝 任涛 作者单位：华南农业大学兽医学院,农业部动物疫病防控重点开放实验室,广东省动物源性人兽共患病预防与控制重点实验室,广东广州 510642 刊 名：动物医学进展 PKU英文刊名：PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE 年，卷(期)： 31(4) 分类号：S852.659.5 关键词：禽流感病毒 H5N2亚型 鉴定 鹦鹉篇5：鸡胚中H9N2亚型禽流感病毒的分离鉴定
鸡胚中H9N2亚型禽流感病毒的分离鉴定
将来自有产蛋下降的肉用型父母代种鸡群的种蛋孵化,每日观察鸡胚死亡情况.在孵化的50个鸡胚中9日龄时开始死亡1个,尿囊液无血凝性,盲传一代后,鸡胚尿囊液有血凝性.在HI试验中,对H9亚型禽流感病毒(AIV)单因子血清在1:26稀释度时呈现血凝抑制活性,对新城疫病毒(NDV)和H5亚型AIV单因子血清不呈血凝抑制活性,由此确定为低致病性禽流感病毒,命名为ZKH90901.对该毒株进行HA和M基因扩增克隆测序,把获得的HA和NA基因与已经发表的.H9N2毒株的相应序列比较,结果表明该毒株确实为H9N2亚型禽流感病毒,HA基因的裂解位点序列为KSGR↓GLF,符合低致病性禽流感病毒H9N2蛋白裂解位点的分子特征,仍属于低致病力毒株.从鸡胚中分离到H9N2亚型禽流感病毒在国内尚未见报道.
作 者：杨其峰 崔治中 巩艳艳 作者单位：杨其峰(山东农业大学河南大用公司技术中心,山东泰安,271018)崔治中,巩艳艳(山东农业大学动物科技学院,山东泰安,271018)
刊 名：中国家禽 PKU英文刊名：CHINA POULTRY 年，卷(期)：2010 32(6) 分类号： 关键词：H9N2亚型禽流感病毒 分离鉴定 序列分析篇6：抗H9亚型禽流感病毒独特型抗体的制备与应用
抗H9亚型禽流感病毒独特型抗体的制备与应用
用纯化的'鸡抗H9亚型禽流感病毒(AIV)免疫球蛋白G(IgG)作为抗原免疫家兔,制备兔源多克隆抗独特型抗体(Pab2),同时免疫小鼠,应用细胞融合技术建立了分泌抗AIV独特型单克隆抗体(Mab2)的杂交瘤细胞系.经鉴定,2类抗独特型抗体均能竞争性地抑制鸡抗AIV IgG与AIV的结合.保护试验证实,兔源多克隆抗独特型抗体疫苗较单克隆抗独特型抗体疫苗具有更高的保护作用.
作 者：李宝全 彭军 牛钟相 姜世金 LI Bao-quan PENG Jun NIU Zhong-xiang JIANG Shi-jin 作者单位：山东农业大学,动物科技学院,山东,泰安,271018 刊 名：中国兽医学报 ISTIC PKU英文刊名：CHINESE JOURNAL OF VETERINARY SCIENCE 年，卷(期)： 26(6) 分类号：S852.65 关键词：禽流感病毒 抗独特型抗体疫苗 免疫保护篇7：抗禽流感H9亚型血凝素单克隆抗体的抗原结合特性分析
抗禽流感H9亚型血凝素单克隆抗体的抗原结合特性分析
为了解和确定抗H9亚型禽流感病毒血凝素单克隆抗体所针对的抗原表位及今后的'确切用途,用竞争性结合ELISA试验结合Western-blotting分析,对10株单克隆抗体的抗原结合特性进行了分析.抗体反应增值结果表明,10株单抗针对的是同一大的抗原决定簇,根据增值结果可将10株单抗分成4个亚群.除2A1外,其他9株单抗的ELISA反应增值结果与Western-blotting分析结果一致,认为可能是由于2A1与其他9株单抗的免疫原不同所致.
作 者：唐应华 张评浒 刘金彪 王海燕 李玉君 刘秀梵 TANG Ying-hua ZHANG Ping-hu LIU Jin-biao WANG Hai-yan LI Yu-jun LIU Xiu-fan 作者单位：扬州大学,农业部畜禽传染病学重点开放实验室,江苏,扬州,225009 刊 名：中国兽医科学 ISTIC PKU英文刊名：VETERINARY SCIENCE IN CHINA 年，卷(期)：2006 36(5) 分类号：Q852.659.6 R392.11 关键词：单克隆抗体 竞争性结合ELISA 抗原结合特性 蛋白质印迹法【H5N1亚型禽流感病毒M2的修饰表达及其免疫原性分析】相关文章：
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