乌药不同提取物对小鼠胃肠运动调节作用的实验讨论论文
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篇1：乌药不同提取物对小鼠胃肠运动调节作用的实验讨论论文
乌药不同提取物对小鼠胃肠运动调节作用的实验讨论论文
乌药为樟科山胡椒属植物乌药Lindera aggregata (Sims)Kosterm.的膨大块根，具有温中散寒、理气止痛的功效。史书有载乌药可治“恶心腹痛，宿食不消……”，临床上常与多种中药配伍，治疗寒凝气滞所致的脘腹疼痛。现代药理研究表明乌药具有抗炎、镇痛、抗氧化、调节平滑肌等广泛的药理活性。为明确其对胃肠道的调节功能，本课题初步探讨乌药不同提取液对消化系统方面的影响。
1 材料与方法
1.1 动物健康KM小鼠，清洁级，体重18-22 g，雌雄各半，长沙市开福区东创实验动物科技服务部代购，动物合格证号：SCXK(湘)-0012。
1.2 药物乌药购于湖南岳阳医药总公司中药饮片加工厂长沙经营部，经湖南中医药大学中药鉴定教研室鉴定为樟科植物乌药Lindera aggregate(Sims)Kosterm.的干燥块根。取乌药200 g，加5倍量水，经挥发油提取器提取12 h，得挥发油0.5 mL保存;药液，过滤，滤渣煎煮1次，过滤，合并两次滤液，最后浓缩成1 g生药/mL的药液。滤渣加75%乙醇回流，得浸膏1.5 g，置冰箱内供实验备用。甲硫酸新斯的明注射液(浙江仙琚制药股份有限公司，批号：12)，硫酸阿托品注射液(浙江金力制药有限公司，批号：0102)。
1.3 样品处理挥发油加5%吐温-80乳化，乙醇提取物配置时加适量二甲基亚砜。助溶剂量药效试验不干扰药理活性。
1.4 统计学方法实验数据均用均数±标准差(x±s)表示，用SPSS17.0软件进行统计分析。进行正态性检验;多组计量资料采用one-way ANOVA。
2 结果
2.1 乌药不同提取物对新斯的明引起的小肠推进亢进的影响小鼠按随机数字表法分为6组，每组10只。分别为正常对照组、模型对照组、阿托品组(0.3 mg/kg)、乌药水提取物组(0.948 g/kg)、乌药醇提取物组(0.074 g/kg)、乌药挥发油提取物组(5.8 μL/kg)，各组分别给予相应药物，1次/d，连续3 d，对照组给予等容积蒸馏水。实验前动物禁食12 h，自由饮水末次给药后1 d，各组动物按0.5 mL/kg皮下注射新斯的明(0.5 g/L，0.25 mg/kg)，正常对照组皮下注射生理盐水，20 min后各组动物灌服5%炭末生理盐水混悬液0.2 mL/10g，灌服炭末生理盐水混悬液20 min将小鼠颈椎脱臼法致死，打开腹腔剪取幽门至回盲部的肠管，不加牵引平铺于托盘上，测量小肠全长及炭末在肠内推进的距离，计算炭末推进百分率。
模型对照组和正常对照组小肠推进率之差异有统计学意义(P<0.05)，提示模型对照组动物小肠推进率高于正常组，说明造模成功。而3个实验组之间该项指标差异无统计学意义，乌药不同提取物对新斯的明引起的小肠推进亢进的影响作用相近。
2.2 乌药不同提取物对阿托品引起的小肠推进抑制的影响
小鼠按随机数字表法分为5组，每组10只。分别为正常对照组、模型对照组、乌药水提取物组(0.948 g/kg)、乌药醇提取物组(0.074 g/kg)、乌药挥发油提取物组(5.8 μL/kg)。第4天给药后40min，除正常对照组外，剩余4组均腹腔注射阿托品0.3mg/kg，20 min后各组动物灌服5%炭末生理盐水混悬液0.2 mL/10 g，灌服炭末生理盐水混悬液20 min将小鼠颈椎脱臼法致死，打开腹腔剪取幽门至回盲部的肠管，不加牵引平铺于托盘上，测量小肠全长及炭末在肠内推进的距离，计算炭末推进百分率。
模型对照组和正常对照组小肠推进率之差异有统计学意义有统计学意义(P<0.05)，提示模型对照组动物小肠推进率高于正常组，说明造模成功。而3个实验组之间该项指标差异无统计学意义，提示乌药不同提取物对阿托品引起的小肠推进抑制的影响作用相近。
3 讨论
胃肠道疾病在世界范围内都是发病率较高的疾病之一，其中以胃肠道蠕动障碍尤为多见，胃肠道蠕动障碍具有反复性和多发性不同程度的影响患者的生活质量。促进胃肠道的蠕动，增强肠道收缩，有利于对抗患者术后胃肠道麻醉性功能障碍，胃肠道的功能恢复影响患者的整体康复质量。
乌药作为重要的温胃理气止痛药之一，主要含有挥发油、异喹啉类、生物碱及呋喃倍半萜3大类成分，现代药理表明其具有良好的镇痛、消炎、扩张血管、抗疲劳等作用。文献报道乌药对胃肠平滑肌既有促进肠蠕动增强肠收缩的功效，又能抑制胃肠平滑肌，缓解其痉挛。据临床试验表明乌药有促进胃肠运动功能的`作用，能明显改善消化不良者的临床症状。课题组前期对乌药不同提取物剂量进行了筛选，试验表明各提取物的高剂量促进正常小鼠的炭末推进作用最强，因此，本实验以为考察剂量。实验结果表明乌药不同提取物对新斯的明致的小鼠小肠推进功能亢进有一定抑制作用，对阿托品致的小鼠小肠推进功能抑制有一定促进作用，具有双向调节作用。此次研究可为药效的物质基础提供依据，也为乌药的临床应用及其多层次的开发利用奠定了一定的基础。但对乌药理气止痛物质基础方面的研究，应当综合化学、药理等多学科技术对乌药进一步的进行系统研究。
篇2：研究乌药不同提取物对小鼠胃肠运动的作用论文
研究乌药不同提取物对小鼠胃肠运动的作用论文
乌药为樟科山胡椒属植物乌药Lindera aggregata （Sims）Kosterm。的膨大块根，具有温中散寒、理气止痛的功效。史书有载乌药可治“恶心腹痛，宿食不消……”，临床上常与多种中药配伍，治疗寒凝气滞所致的脘腹疼痛。现代药理研究表明乌药具有抗炎、镇痛、抗氧化、调节平滑肌等广泛的药理活性。为明确其对胃肠道的调节功能，本课题初步探讨乌药不同提取液对消化系统方面的影响。
1 材料与方法
1。1 动物
健康KM小鼠，清洁级，体重18—22 g，雌雄各半，长沙市开福区东创实验动物科技服务部代购，动物合格证号：SCXK（湘）2009—0012。
1。2 药物
乌药购于湖南岳阳医药总公司中药饮片加工厂长沙经营部，经湖南中医药大学中药鉴定教研室鉴定为樟科植物乌药Lindera aggregate（Sims）Kosterm。的干燥块根。取乌药200 g，加5倍量水，经挥发油提取器提取12 h，得挥发油0。5 mL保存；药液，过滤，滤渣煎煮1次，过滤，合并两次滤液，最后浓缩成1 g生药/mL的药液。滤渣加75%乙醇回流，得浸膏1。5 g，置冰箱内供实验备用。甲硫酸新斯的明注射液（浙江仙琚制药股份有限公司，批号：120102），硫酸阿托品注射液（浙江金力制药有限公司，批号：20130102）。
1。3 样品处理
挥发油加5%吐温—80乳化，乙醇提取物配置时加适量二甲基亚砜。助溶剂量药效试验不干扰药理活性。
1。4 统计学方法
实验数据均用均数±标准差（x±s）表示，用SPSS17。0软件进行统计分析。进行正态性检验；多组计量资料采用one—way ANOVA。
2 结果
2。1 乌药不同提取物对新斯的明引起的小肠推进亢进的.影响
小鼠按随机数字表法分为6组，每组10只。分别为正常对照组、模型对照组、阿托品组（0。3 mg/kg）、乌药水提取物组（0。948 g/kg）、乌药醇提取物组（0。074 g/kg）、乌药挥发油提取物组（5。8 μL/kg），各组分别给予相应药物，1次/d，连续3 d，对照组给予等容积蒸馏水。实验前动物禁食12 h，自由饮水末次给药后1 d，各组动物按0。5 mL/kg皮下注射新斯的明（0。5 g/L，0。25 mg/kg），正常对照组皮下注射生理盐水，20 min后各组动物灌服5%炭末生理盐水混悬液0。2 mL/10g，灌服炭末生理盐水混悬液20 min将小鼠颈椎脱臼法致死，打开腹腔剪取幽门至回盲部的肠管，不加牵引平铺于托盘上，测量小肠全长及炭末在肠内推进的距离，计算炭末推进百分率。模型对照组和正常对照组小肠推进率之差异有统计学意义（P<0。05），提示模型对照组动物小肠推进率高于正常组，说明造模成功。而3个实验组之间该项指标差异无统计学意义，乌药不同提取物对新斯的明引起的小肠推进亢进的影响作用相近。
2。2 乌药不同提取物对阿托品引起的小肠推进抑制的影响
小鼠按随机数字表法分为5组，每组10只。分别为正常对照组、模型对照组、乌药水提取物组（0。948 g/kg）、乌药醇提取物组（0。074 g/kg）、乌药挥发油提取物组（5。8 μL/kg）。第4天给药后40min，除正常对照组外，剩余4组均腹腔注射阿托品0。3mg/kg，20 min后各组动物灌服5%炭末生理盐水混悬液0。2 mL/10 g，灌服炭末生理盐水混悬液20 min将小鼠颈椎脱臼法致死，打开腹腔剪取幽门至回盲部的肠管，不加牵引平铺于托盘上，测量小肠全长及炭末在肠内推进的距离，计算炭末推进百分率。模型对照组和正常对照组小肠推进率之差异有统计学意义有统计学意义（P<0。05），提示模型对照组动物小肠推进率高于正常组，说明造模成功。而3个实验组之间该项指标差异无统计学意义，提示乌药不同提取物对阿托品引起的小肠推进抑制的影响作用相近。
3 讨论
胃肠道疾病在世界范围内都是发病率较高的疾病之一，其中以胃肠道蠕动障碍尤为多见，胃肠道蠕动障碍具有反复性和多发性不同程度的影响患者的生活质量。促进胃肠道的蠕动，增强肠道收缩，有利于对抗患者术后胃肠道麻醉性功能障碍，胃肠道的功能恢复影响患者的整体康复质量。
乌药作为重要的温胃理气止痛药之一，主要含有挥发油、异喹啉类、生物碱及呋喃倍半萜3大类成分，现代药理表明其具有良好的镇痛、消炎、扩张血管、抗疲劳等作用。文献报道[4]乌药对胃肠平滑肌既有促进肠蠕动增强肠收缩的功效，又能抑制胃肠平滑肌，缓解其痉挛。据临床试验表明乌药有促进胃肠运动功能的作用，能明显改善消化不良者的临床症状。课题组前期对乌药不同提取物剂量进行了筛选，试验表明各提取物的高剂量促进正常小鼠的炭末推进作用最强，因此，本实验以为考察剂量。实验结果表明乌药不同提取物对新斯的明致的小鼠小肠推进功能亢进有一定抑制作用，对阿托品致的小鼠小肠推进功能抑制有一定促进作用，具有双向调节作用。此次研究可为药效的物质基础提供依据，也为乌药的临床应用及其多层次的开发利用奠定了一定的基础。但对乌药理气止痛物质基础方面的研究，应当综合化学、药理等多学科技术对乌药进一步的进行系统研究。
篇3：论重楼水提液对小鼠胃肠运动功能的影响论文
论关于重楼水提液对小鼠胃肠运动功能的影响论文
胃肠动力学异常性疾病发病率日益增高，而中药在调节和改善胃肠功能方面有着自身的优势。重楼为百 合 科 植 物 云 南 重 楼 ( Paris polyphylla var.yunnanensis) 的干燥根茎，又 名 七 叶 一 枝 花 ( Parispolyphylla var. chinensis)，以蚤休之名始载于《神农本草经》。其主要有效成分为甾体皂苷，并含有氨基酸、甾酮、蜕皮激素、黄酮苷等化合物。重楼药用历史悠久，近年来药理研究表明，该属植物具有止血、抗肿瘤、抗菌、抗炎等多方面药理作用。临床上，应用重楼治疗的疾病越来越多，重楼是否影响胃肠功能，目前尚未见报道。本实验以小鼠为研究对象，初步探讨重楼水取液对小白鼠胃肠运动功能的影响。
1 材料与方法
1. 1 试剂 重楼(广西壮族自治区百色市市售药材)，经广西右江民族医学院民族医学教研室覃道光教授鉴定为重楼根茎;活性碳末(广东台山化工厂，批号:940402);羧甲基纤维素钠(天津市光复精细化工研究所，批号:20070708);硫酸阿托品注射液(河南润弘制药股份有限公司，批号:1104161);盐酸肾上腺素注射液(天津药业集团新郑股份有限公司，批号:100912);新斯的明注射液(郑州羚锐制药股份有限公司，批号:1005161)。
1. 2 动物 昆明种小鼠 150 只，体质量 22 ～ 28 g，雌雄不限，由本院实验动物中心提供，合格证号:SCXK(桂)2003-0003。
1. 3 仪器 ARII40/C 电子天平(奥毫斯，上海公司生产)。
1. 4 重楼水提液的制备 称取重楼饮片 50 g，加入10 倍量水(500 mL)常温浸泡18 h，大火煮沸后慢火煎煮1 h，过滤留下滤液，取滤渣再加水500 mL 煮沸后慢火煎煮1 h，过滤弃滤渣，合并两次滤液用16 层纱布过滤，隔水蒸发浓缩，定容为 1 g·mL-1 ，冰箱冷藏，用时恢复至室温。
1. 5 碳末悬液的制备 称取活性碳末 5 g、羧甲基纤维素钠 1 g 溶于 100 mL 双蒸水中，搅拌均匀配制成碳末悬液，冰箱冷藏，用时恢复至室温。
1. 6 对正常小鼠胃排空和小肠推进运动的影响 取30 只小鼠按体质量随机分 3 组，即重楼水提液低剂量组(2. 5 g·kg-1 )，重楼水提液高剂量组(5. 0 g·kg-1 )和正常对照组，每组 10 只。灌胃给药前，小鼠禁食12 h，每组小鼠均按每千克体质量剂量灌胃给药，对照组给予等体积双蒸水。灌胃给药 30 min 后，再以5%碳末悬液 0. 25 mL·(10 g)-1灌胃给药。20 min后，将小鼠处死，打开腹腔，结扎胃贲门和幽门，取出胃，用滤纸吸干后称质量，然后沿胃大弯剪开胃体，洗去胃内容物，再用滤纸吸干，称胃净质量。计算胃内容物残留率(%) = [(胃全质量 - 胃净质量) /半固体米糊]×100% 。以胃内容物残留率为指标评价胃排空速度。同时取出小肠自然平铺于桌面上，将小肠摆成直线并测量，以幽门至回盲部的距离作为“小肠总长度”，以幽门至炭末推进前端的距离作为“炭末推进距离”。用下列公式计算炭末推进百分比:炭末推进比(%) = 炭末在小肠内推进距离/小肠总长度 ×100%。以炭末推进比为指标评价小肠推进速度。
1. 7 对阿托品所致小鼠胃排空和小肠推进抑制的影响 取小鼠 40 只，随机分成 4 组，即正常对照组、单纯阿托品组(0. 5 mg·kg-1 )、阿托品 + 重楼水提液低剂量组(2. 5 g·kg-1 )、阿托品 + 重楼水提液高剂量组(5 g·kg-1 )。实验前小鼠禁食 12 h，重楼水提液高、低两个剂量组的给药剂量和方法同“1. 6”项，正常对照组和阿托品组给予等体积双蒸水。灌胃给药的同时正常对照组肌内注射等体积双蒸水，其余各组小鼠均按 0. 5 mg·kg-1 肌内注射阿托品，注射给药30 min后，操作方法及计算方法按“1. 6”项进行。
1. 8 对肾上腺素所致小鼠胃排空和小肠推进抑制的影响 取小鼠 40 只，随机分成 4 组，即正常对照组、单纯肾上腺素组(0. 3 mg·kg-1 )、肾上腺素 + 重楼水提液低剂量组(2. 5 g·kg-1 )、肾上腺素 + 重楼水提液高剂量组(5 g·kg-1 )。实验前小鼠禁食 12 h，重楼水提液高、低两个剂量组的给药剂量和方法同“1. 6”项，正常对照组和肾上腺素组给予等体积双蒸水。灌胃给药的同时正常对照组肌内注射等体积双蒸水，其余各组小鼠均按 0. 3 mg·kg-1 肌内注射肾上腺素，注射给药30 min后，操作方法及计算方法按“1. 6”项进行。
1. 9 对新斯的明所致小鼠胃排空和小肠推进亢进的影响 取小鼠 40 只，随机分成 4 组，即新斯的明组(0. 125 mg·kg-1 )、新斯的明 + 重楼水提液低剂量组(2. 5 g·kg-1 )、新斯的明 + 重楼水提液高剂量组(5 g·kg-1 )、和正常对照组，每组 10 只 。实验前小鼠禁食 12 h，重楼水提液高、低两个剂量组的给药剂量和方法同“1. 6”项，对照组给予等体积双蒸水。新斯的明组、新斯的明 + 重楼水提液低剂量组、新斯的明+ 重楼水提液高剂量组在灌胃给药的.同时均按0. 125 mg·kg-1 肌内注射新斯的明，正常对照组肌内注射等体积双蒸水。注射给药 30 min 后，操作方法及计算方法按“1. 6”项进行。1.10 统计学方法 采用 SPSS 13. 0 版统计软件进行统计学分析，数据以均数 ± 标准差(x ± s)表示，采用单因素方差分析，P<0. 05 表示差异有统计学意义。
2 结果
2. 1 对正常小鼠胃排空和小肠推进运动的影响 结果表明，与正常对照组比较，重楼水提液高、低两个剂量组的胃内残留率和小肠推进率差异有统计学意义。
2. 2 对阿托品所致小鼠胃排空和小肠推进抑制的影响 结果表明，与正常对照组比较，阿托品组的胃内残留率和小肠推进率均差异有统计学意义。与阿托品组比较，重楼水提液低剂量组的小肠推进率和重楼水提液高剂量组的胃内残留率均差异有统计学意义。
2. 3 对肾上腺素所致小鼠胃排空和小肠推进抑制的影响 结果表明，与正常对照组比较，肾上腺素组的胃内残留率和小肠推进率均差异有统计学意义。与肾上腺素组比较，重楼水提液低剂量组的小肠推进率和重楼水提液高剂量组的胃内残留率差异均有统计学意义。见表 3。2. 4 对新斯的明所致小鼠胃排空和小肠推进亢进的影响 结果表明，与正常对照组比较，新斯的明组的胃内残留率和小肠推进率均差异有统计学意义。与新斯的明组比较，重楼水提液高、低两个剂量组的胃内残留率和小肠推进率均差异有统计学意义。
3 讨论
3.1 胃肠运动的调节因素 胃肠运动主要由神经、体液因素进行调节。神经调节包括交感神经、副交感神经和存在肠壁内的肠神经系统 。交感神经神经末梢通过释放去甲肾上腺素，作用于胃肠道平滑肌细胞膜上的肾上腺素能受体，而抑制胃肠运动。副交感神经末梢通过释放乙酰胆碱，作用于胃肠道平滑肌细胞膜上的 M 受体，而促进胃肠运动。胃肠道上主要存在胆碱能 M 受体、肾上腺素 α 和 β 受体、组胺受体及多种胃肠激素受体。体液因素主要是胃肠激素的调节，胃肠激素种类较多，不同的胃肠激素，对胃肠活动产生不同的效应。
3. 2 重楼水提液对正常小鼠胃肠运动功能的影响实验表明，重楼水提液低剂量组有促进小鼠小肠推进作用，重楼水提液高剂量组有抑制小鼠小肠推进作用，重楼水提液高、低两个剂量组均有抑制小鼠胃排空的作用。此结果提示，在完整的神经体液因素调节下，不同剂量的重楼水提液对正常小鼠小肠推进功能表现不一;但均能抑制正常小鼠胃排空功能，这可能与肠道活动比胃活动更复杂性有关。
3. 3 重楼水提液对胆碱能系统的影响 新斯的明为可逆性的抗胆碱酯酶药物 ，使胆碱能神经末梢释放的乙酰胆碱破坏减少，突触间隙中乙酰胆碱积聚，具有兴奋胆碱能 M 受体的作用。实验表明，重楼水提液高、低两个剂量组均有拮抗新斯的明，抑制小鼠胃排空和小肠推进的作用。此结果提示，重楼水提液对胃肠运动抑制作用可能与阻断 M 胆碱能受体有关。阿托品是临床上常用的一种 M 受体拮抗药，通过阻断 M 胆碱能受体，使副交感神经抑制，导致胃肠平滑肌松，小肠推进运动减慢，临床上常用于胃肠痉挛等疾病的治疗。实验表明，重楼水提液低剂量组有拮抗阿托品，促进小鼠小肠推进的作用，而重楼水提液高剂量组有协同阿托品，抑制小鼠胃排空的作用。此结果提示，重楼水提液对胃肠运动功能的影响可能不是单纯与阻断M 胆碱能受体有关。
3. 4 重楼水提液对肾上腺素能系统的影响 支配胃肠的交感神经属于肾上腺素能神经，其末梢通过释放去甲肾上腺素，作用于胃肠道平滑肌细胞膜上的肾上腺素能受体，而抑制胃肠运动。实验表明，重楼水提液低剂量组有拮抗肾上腺素，促进小鼠小肠推进的作用，而重楼水提液高剂量组有协同肾上腺素，抑制小鼠胃排空的作用。此结果提示，重楼水提液对胃肠运动功能的影响可能与肾上腺素能系统有关。综上所述，重楼水提液可抑制胃运动，具有解除胃痉挛的作用，对于小肠运动，则不同的剂量产生不同的效应。因此，笔者推测重楼水提液对胃肠运动功能的影响除了与 M 胆碱能受体、肾上腺素能系统有关外;也可能是由于中草药成分复杂，胃肠机能状态存在差异，对药物中不同成分具有不同的反应结果;其作用机制有待进一步深入研究。本实验对治疗胃痉挛、肠功能紊乱等疾病提供一定的药理理论基础。
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