重组酶Cre基因在大肠杆菌中的高效表达及其一步纯化和活性检测

“后半月的日子”通过精心收集，向本站投稿了3篇重组酶Cre基因在大肠杆菌中的高效表达及其一步纯化和活性检测，以下是小编为大家准备的重组酶Cre基因在大肠杆菌中的高效表达及其一步纯化和活性检测，供大家参考借鉴，希望可以帮助到有需要的朋友。

篇1：重组酶Cre基因在大肠杆菌中的高效表达及其一步纯化和活性检测

重组酶Cre基因在大肠杆菌中的高效表达及其一步纯化和活性检测

为了实现DNA重组酶Cre在体外的应用,以pET-30a高效表达载体为基础构建了pTE30-Cre质粒.将此质粒导入大肠杆菌BL21(DE3)中进行IPTG诱导的Cre基因的`高效表达.对表达出的Cre重组酶蛋白进行镍离子鳌合法一步纯化,并以带有两个同向loxP位点的质粒为底物,对纯化出的Cre酶进行活性检测.该实验为Cre酶的体外应用奠定了基础.

作 者：王文棋 盖颖 陆海 蒋湘宁 WANG Wen-qi GAI Ying LU Hai JIANG Xiang-ning  作者单位：北京林业大学生物科学与技术学院 刊 名：北京林业大学学报  ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF BEIJING FORESTRY UNIVERSITY 年，卷(期)： 28(3) 分类号：Q559+.1 关键词：DNA重组酶Cre   pET30-Cre高效表达   一步纯化   Cre酶活性检测  

篇2：pfl-act基因在大肠杆菌中的高效表达及其纯化

pfl-act基因在大肠杆菌中的高效表达及其纯化

丙酮酸甲酸裂解酶是肠道细菌在厌氧代谢中十分关键的酶,丙酮酸甲酸裂解酶激活因子(pyruvate formate lyase activator,PFL-A)在功能上具有重要的作用.为进一步研究PFL-A的`激活机理,以大肠杆菌K-12的基因组为模板,通过GenBank上公布的序列设计引物,扩增出目的基因,克隆到pMD18-T载体,经测序,所扩增出的基因与pfl-act基因具有99%的同源性.将pfl-act连接到高效表达载体pET-22b(+)中,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导,结果发现,pfl-act以包涵体形式表达.改变诱导剂、诱导剂量或培养温度,对包涵体的形成均没有明显的影响.

作 者：杨登峰 韦宇拓 黄志明 周兴 黄日波 YANG Deng-feng WEI Yu-tuo HUANG Zhi-ming ZHOU Xing HUANG Ri-bo  作者单位：杨登峰,黄志明,周兴,YANG Deng-feng,HUANG Zhi-ming,ZHOU Xing(广西科学院,广西,南宁,530003)

韦宇拓,黄日波,WEI Yu-tuo,HUANG Ri-bo(广西大学,生命科学与技术学院,广西,南宁,530005;广西亚热带生物资源保护利用重点实验室,广西,南宁,530005)

刊 名：广西农业生物科学  ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF GUANGXI AGRICULTURAL AND BIOLOGICAL SCIENCE 年，卷(期)：2006 25(4) 分类号：Q782 关键词：丙酮酸甲酸裂解酶激活因子   包涵体   高效表达  

篇3：枯草杆菌纳豆激酶基因在大肠杆菌中的优化高效表达

枯草杆菌纳豆激酶基因在大肠杆菌中的优化高效表达

在克隆、表达纳豆激酶基因的'基础上,对IPTG浓度以及诱导时间两个重要影响因子进行优化选择.结果表明,在IPTG 100μg/mL诱导2.5h时,纳豆激酶的表达量相对较高,约占菌体蛋白重量的46.63%,为实验最佳的诱导条件.

作 者：扈会平张立全 格根通拉嘎 HU Hui-ping ZHANG Li-quan Gegentonglaga  作者单位：扈会平,HU Hui-ping(丽珠集团制药厂,广东,珠海519000;内蒙古大学,生命科学学院,内蒙古,呼和浩特010021)

张立全,格根通拉嘎,ZHANG Li-quan,Gegentonglaga(内蒙古大学,生命科学学院,内蒙古,呼和浩特010021)

刊 名：内蒙古师范大学学报（自然科学汉文版）  ISTIC英文刊名：JOURNAL OF INNER MONGOLIA NORMAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION) 年，卷(期)：2008 37(4) 分类号：Q786 关键词：枯草杆菌   纳豆激酶   优化表达   大肠杆菌  

【重组酶Cre基因在大肠杆菌中的高效表达及其一步纯化和活性检测】相关文章：

1.H5N1型禽流感病毒HA基因在烟草中的表达

2.截短型HCV NS5B RNA聚合酶在大肠杆菌中表达纯化及鉴定