B型肉毒毒素保护性抗原He在大肠杆菌中的可溶性高表达

“Sweet钱”通过精心收集，向本站投稿了7篇B型肉毒毒素保护性抗原He在大肠杆菌中的可溶性高表达，下面是小编为大家整理后的B型肉毒毒素保护性抗原He在大肠杆菌中的可溶性高表达，欢迎阅读与收藏。

篇1：B型肉毒毒素保护性抗原He在大肠杆菌中的可溶性高表达

B型肉毒毒素保护性抗原He在大肠杆菌中的可溶性高表达

目的:通过序列优化及表达条件改进,在大肠杆菌中高效可溶性表达B型肉毒毒素保护性抗原Hc(Bont/B-Hc).方法:对Bont/B-Hc基因片段优化,用大肠杆菌常用密码子替换稀有密码子,并将(G+C)含量由76.2%降至56.3%;人工合成多条具有重叠互补序列的寡核苷酸片段,采用重叠延伸PCR方法获得了Bont/B-Hc的全长基因,并构建了原核可溶性表达载体;将经酶切和测序鉴定正确的重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,用IPTG诱导Bont/B-Hc的表达并进行纯化及Western印迹鉴定.结果和结论:目的'蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中获得了可溶性高表达,占菌体裂解液上清总蛋白的26.7%,表达量达到30 mg/L,是目前国内外已知表达的最高水平;经Ni柱一步纯化后,目的蛋白纯度可达到80.3%,为肉毒毒素中和抗体的制备及亚单位疫苗的研究奠定了基础.

作 者：于蕊 王双 余云舟 俞炜源 孙志伟 YU Rui WANG Shuang YU Yun-Zhou YU Wei-Yuan SUN Zhi-Wei  作者单位：军事医学科学院,生物工程研究所,北京,100071 刊 名：生物技术通讯  ISTIC英文刊名：LETTERS IN BIOTECHNOLOGY 年，卷(期)： 19(3) 分类号：Q78 关键词：B型肉毒毒素   保护性抗原He   可溶性高表达  

篇2：重组人成纤维细胞生长因子-8a在大肠杆菌中的可溶性表达

重组人成纤维细胞生长因子-8a在大肠杆菌中的可溶性表达

通过低温诱导,成功实现了重组人成纤维细胞生长因子-8a蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达.进一步研究了温度、IPTC浓度、诱导时长、诱导时期(OD600)、培养基类型这5个因素对重组人成纤维细胞生长因子-8a蛋白可溶性表达的.影响,确定了可溶性表达最优化条件.优化表达条件后实现可溶性表达率大干30%.

作 者：付灿 FU Can  作者单位：菏泽学院生命科学系,山东菏泽,274015 刊 名：菏泽学院学报 英文刊名：JOURNAL OF HEZE UNIVERSITY 年，卷(期)： 31(2) 分类号：Q786 关键词：重组   人类   成纤维细胞生长因子-8a   大肠杆菌   可溶性表达  

篇3：外源蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达策略

外源蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达策略

长期以来,大肠杆菌一直是表达外源蛋白的首选表达系统.但由于外源蛋白在表达过程中容易被宿主细胞蛋白酶降解或者形成包涵体,其应用受到了限制.本文综述了在大肠杆菌中表达可溶外源蛋白的策略和进展,以期提高具有生物活性的外源基因的`表达水平.

作 者：朱红裕 李强 ZHU Hong-yu LI Qiang  作者单位：清华大学化学工程系生物化工研究所,北京,100084 刊 名：过程工程学报  ISTIC PKU英文刊名：THE CHINESE JOURNAL OF PROCESS ENGINEERING 年，卷(期)： 6(1) 分类号：Q81 关键词：外源蛋白   可溶性表达   大肠杆菌  

篇4：猪丹毒丝菌C43065株表面保护性抗原A N端保护区在大肠杆菌中的表达

猪丹毒丝菌C43065株表面保护性抗原A N端保护区在大肠杆菌中的表达

目的:在大肠杆菌中表达猪丹毒丝菌C43065株表面保护性抗原A(SpaA)N端保护区(SpaA-N),并检测其抗原性.方法:利用PCR方法从猪丹毒丝菌C43065株基因组中扩增出spaA基因片段,构建pMD18-spaA重组质粒并对插入片段进行测序;以pMD18-spaA重组质粒为模板,PCR扩增得到spoA-N基因片段,构建重组表达质粒pGEX-spaA-N,经序列测定证实正确后转化大肠杆菌BL21(DE3),再经IFrG诱导表达GST-SpaA-N融合蛋白并纯化.结果:扩增得到的`spaA基因长1 881 bp,编码由626个氨基酸残基构成的多肽;SDS-PAGE和Western印迹检测结果表明,诱导表达获得相对分子质量约64 000的GST-SpaA-N融合蛋白,该融合蛋白能与相应抗体发生特异性反应.结论:获得了在大肠杆菌中可溶性表达的GST-SpaA-N融合蛋白,为进一步研究猪丹毒丝菌免疫保护性抗原奠定了基础.

作 者：吾鲁木汗・那孜尔别克 张磊 何翠 彭清静 恩特马克・布拉提白 Wulumuhan Nazierbieke ZHANG Lei HE Cui PENG Qing-Jing Entomack Borrathybay  作者单位：吉首大学,生物资源与环境科学学院,省部共建生物工程实验室,湖南,吉首,416000 刊 名：生物技术通讯  ISTIC英文刊名：LETTERS IN BIOTECHNOLOGY 年，卷(期)： 19(4) 分类号：Q78 关键词：猪丹毒丝菌   表面保护性抗原A   原核表达   抗原性  

篇5：截短型HCV NS5B RNA聚合酶在大肠杆菌中表达纯化及鉴定

截短型HCV NS5B RNA聚合酶在大肠杆菌中表达纯化及鉴定

为构建HCV截短型ns5b△21基因的原核表达质粒;在大肠杆菌中表达NS5B蛋白并纯化,制备其抗体.运用软件设计引物,以BB7复制子为模板PCR扩增ns5b△21基因;克隆入原核表达载体pRSETA.将重组表达质粒pRSETA-ns5b△21转化B121大肠杆菌,并诱导表达、可溶性分析及纯化;用纯化的.NS5B蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体.结果酶切鉴定和序列测定表明成功的构建了重组表达质粒pRSETA-ns5b△21;其经IPTG诱导后行SDS-PAGE可见新生表达条带,Western-blot证实了其特异性和抗原性良好;利用镍离子亲和层析和电洗脱方法获得了纯化NS5B蛋白;用纯化蛋白免疫小鼠制备出了多价抗血清.说明表达和纯化的截短型HCV NS5B RNA聚合酶可用于下一步筛选单链抗体.

作 者：田江红 徐志凯 雷迎峰 尹文 陈任安 汪桦 吕欣 杨敬 孙梦宁 姚敏  作者单位：第四军医大学基础部微生物学教研室,西安,710032 刊 名：科学技术与工程  ISTIC英文刊名：SCIENCE TECHNOLOGY AND ENGINEERING 年，卷(期)： 10(4) 分类号：Q343.17 关键词：HCV   NS5B RNA聚合酶   大肠杆菌   蛋白表达  

篇6：猪圆环病毒2型ORF2基因克隆及其在大肠杆菌中的融合表达

猪圆环病毒2型ORF2基因克隆及其在大肠杆菌中的融合表达

猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)是仔猪断奶后多系统衰竭综合征(PWMS)的病原.它不但可以引起断奶仔猪发生衰竭、死亡,更为严重的是PCV2的`感染可以造成免疫抑制,引起其他各种病原的继发感染[1],造成的间接损失难以估计.目前,PCV2己经成为严重阻碍养猪业发展的主要病原之一.

作 者：王老七 陶海静 郑宝亮 边传周  作者单位：郑州牧业工程高等专科学校生物工程系,河南,郑州,450011 刊 名：中国兽医杂志  PKU英文刊名：CHINESE JOURNAL OF VETERINARY MEDICINE 年，卷(期)： 43(7) 分类号：Q786 关键词： 

篇7：鱼腥藻Ⅱ型果糖-1,6-二磷酸醛缩酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的高效表达

鱼腥藻Ⅱ型果糖-1,6-二磷酸醛缩酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的高效表达

随着更多蓝藻全基因组序列测定完成,蓝藻基因工程研究现已进入后基因组时代.2001年Kaneko等完成了鱼腥藻7120全基因组序列测定,随后人们利用生物信息学的方法对其中一些基因的功能进行了预测,包括Ⅱ型果糖-1,6-二磷酸醛缩酶(FBA)基因,但该基因是否编码Ⅱ型果糖-1,6-二磷酸醛缩酶及该产物的'相关酶学特性至今尚未见报道.通过PCR克隆到鱼腥藻7120中预测的Ⅱ型FBA基因,插入到质粒pET-32a的相应位点,构建成原核表达载体pET-FBA-Ⅱ.蛋白电泳结果显示,重组蛋白的表达量占总蛋白含量的23.4%,与蛋白分子标记相比,其分子量约为40 kDa.酶学活性测定结果表明,其蛋白粗提物的比活力为11.8 U(mg protein)-1,具有标准Ⅱ型FBA活性.证实了Cyanobase中关于该基因功能的预测,也为进一步研究该基因表达产物的生理生化特性及功能提供了重要资料.

作 者：魏兰珍 崔轶文 马为民 王全喜 WEI Lan-zhen CUI Yi-wen MA Wei-min WANG Quan-xi  作者单位：上海师范大学生命与环境科学学院,上海,200234 刊 名：中国生物工程杂志  ISTIC PKU英文刊名：CHINA BIOTECHNOLOGY 年，卷(期)：2006 26(5) 分类号：Q78 关键词：果糖-1,6-二磷酸醛缩酶   鱼腥藻7120   表达   酶活  

【B型肉毒毒素保护性抗原He在大肠杆菌中的可溶性高表达】相关文章：

1.肉毒毒素E型重链的生物信息学分析

2.截短型HCV NS5B RNA聚合酶在大肠杆菌中表达纯化及鉴定