抗芽殖酵母端粒G4-DNA结构的单克隆抗体和基因工程单链抗体片段的制备和

“错过了丸子”通过精心收集，向本站投稿了2篇抗芽殖酵母端粒G4-DNA结构的单克隆抗体和基因工程单链抗体片段的制备和，以下是小编精心整理后的抗芽殖酵母端粒G4-DNA结构的单克隆抗体和基因工程单链抗体片段的制备和，供大家参考借鉴，希望可以帮助到有需要的朋友。

篇1：抗芽殖酵母端粒G4-DNA结构的单克隆抗体和基因工程单链抗体片段的制备和

抗芽殖酵母端粒G4-DNA结构的单克隆抗体和基因工程单链抗体片段的制备和定性研究

大多数真核生物端粒3'末端由富含鸟苷酸的重复序列组成,并可以在体外形成四链G4-DNA结构.为了解这种结构是否在体内存在,本文中我们以芽殖酵母作为研究对象,将G4-DNA作为抗原免疫BALB/c小鼠,制备抗G4-DNA的单克隆抗体,结果显示该抗体能够特异性识别富含鸟苷酸重复序列DNA.为了提高抗体的特异性,我们通过基因工程制备抗体:利用RT-PCR的方法,得到抗体重链和轻链可变区的基因,然后克隆到载体pET22b中得到表达质粒pET22b-scFv,转入大肠杆菌进行表达.在细胞周质中我们检测并纯化到了目的基因的表达产物.另外,我们还利用该基因序列进行了初步的结构分析.基因工程抗体在大肠杆菌中的.成功表达及结构分析为今后利用该抗体进行定点突变来研制高特异性和亲和力的抗G4-DNA抗体奠定了基础.

作 者：董琦 DONG Qi  作者单位：中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所,上海,31 刊 名：分子细胞生物学报  ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF MOLECULAR CELL BIOLOGY 年，卷(期)： 39(5) 分类号：Q94 关键词：端粒   G4-DNA   抗G4-DNA   抗体scFv  

篇2：抗HBsAg单链抗体特异性单克隆抗体的制备及应用

抗HBsAg单链抗体特异性单克隆抗体的制备及应用

目的 获得抗HBsAg单链抗体 (HBScFv)的单克隆抗体,并初步研究其在抗HBsAg类小分子抗体及其融合蛋白质的纯化、活性鉴定方面的应用.方法 利用杂交瘤技术,以大肠杆菌表达的重组抗HBScFv为抗原,免疫Balb/c小鼠,再将小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行细胞融合.通过ELISA法、Western-blot鉴定特异性单克隆抗体,通过免疫双扩散法鉴定单抗亚型,并将筛选到的高效价单抗用于抗HBsAg Fab抗体等重组蛋白质的亲和色谱及ELISA鉴定.结果 建立了9株能够稳定分泌抗HBScFv特异性单克隆抗体的'细胞株,其细胞上清效价为1:160～1:12 800,腹水效价为1:50 000～1:400 000;单克隆抗体的亚类分析结果显示有6株为IgG1,其余3株为IgG2a.初步应用结果 表明制备的单克隆抗体14F7可用于抗HBsAg Fab抗体等重组蛋白质的亲和色谱及活性鉴定.结论 成功建立了能够稳定分泌HBScFv特异性单克隆抗体的细胞株.

作 者：陈文吟 饶桂荣 任向荣 郑业华 粟宽源 CHEN Wen-yin RAO Gui-rong REN Xiang-rong ZHENG Ye-hua SU Kuan-yuan  作者单位：空军广州医院,肝病研究所,广东,广州,510602 刊 名：中国生化药物杂志  ISTIC PKU英文刊名：CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMICAL PHARMACEUTICS 年，卷(期)：2006 27(5) 分类号：Q785 关键词：抗HBsAg单链抗体   单克隆抗体   制备  

【抗芽殖酵母端粒G4-DNA结构的单克隆抗体和基因工程单链抗体片段的制备和】相关文章：