桃儿七的组织培养
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篇1：桃儿七的组织培养
桃儿七的组织培养
1植物名称桃儿七[Sinopodophyllum emodi(Wall.)Ying]. 2材料类别成熟种子胚. 3培养条件基本培养基为MS.(1)胚萌发培养基:改良MS(1/2MS大量元素,无激素);(2)幼苗增殖培养基:MS+6-BA 2～3mg・L-1(单位下同);(3)生根培养基:MS+NAA 0.5+IBA 0.5.培养基加3%蔗糖和0.7%琼脂,pH 5.8.培养温度(23±2)℃,光照时间10 h・d-1,光强为40μmol・m-2・s-1.
作 者：杨晖 王治业 陆栋 赵小峰 周剑平YANG Hui WANG Zhi-Ye LU Dong ZHAO Xiao-Feng ZHOU Jian-Ping 作者单位：杨晖,王治业,赵小峰,周剑平,YANG Hui,WANG Zhi-Ye,ZHAO Xiao-Feng,ZHOU Jian-Ping(甘肃省科学院生物研究所,兰州,730000)陆栋,LU Dong(兰州大学生命科学学院,兰州,730000)
刊 名：植物生理学通讯 ISTIC PKU英文刊名：PLANT PHYSIOLOGY COMMUNICATIONS 年，卷(期)： 42(1) 分类号：Q945 关键词：篇2：植物组织培养
烟草的再生
前言 植物的组织培养广义又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。狭义是指组培指用植物各部分组织，如形成层、薄壁组织、叶肉组织、胚乳等进行培养获得再生植株，也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养，愈伤组织再经过再分化形成再生植物。
在实践中，根据所培养的植物材料的不同，可以把组织材料分为5种类型，即愈伤组织、悬浮细胞培养、器官培养（胚、花药、子房、根和茎的培养等）、茎尖分生组织和原生质体培养。这5种培养类型虽然各有特点，但又相互有联系。例如，愈伤组织常常是悬浮细胞和原生质体的来源，但是很多情况下，悬浮细胞和原生质体最终又要通过形成愈伤组织才能产生再生植株。
19世纪30年代，德国植物学家施莱登和德国动物学家施旺创立了细胞学说，根据这一学说，如果给细胞提供和生物体内一样的条件，每个细胞都应该能够独立生活。19，德国植物学家哈伯兰特在细胞全能性的理论是植物组培的理论基础。1958年，一个振奋人心的消息从美国传向世界各地，美国植物学家斯蒂瓦特等人，用胡萝www.unjs.cOm卜韧皮部的细胞进行培养，终于得到了完整植株，并且这一植株能够开花结果，证实了哈伯兰特在五十多年前关于细胞全能的预言。植物组培的简单过程如下：剪接植物器官或组织――经过脱分化形成愈伤组织――再经过再分化形成组织或器官――经过培养发育成一颗完整的植株。植物组培的大致过程是：在无菌条件下，将植物器官或组织（如芽、茎尖、根尖或花药）的一部分切下来，用纤维素酶与果胶酶处理用以去掉细胞壁，使之露出原生质体，然后放在适当的人工培养基上进行培养，这些器官或组织就会进行细胞分裂，形成新的组织。不过这种组织没有发生分化，只是一团薄壁细胞，叫做愈伤组织。在适合的光照、温度和一定的营养物质与激素等条件下，愈伤组织便开始分化，产生出植物的各种器官和组织，进而发育成一棵完整的植株。 植物组织培养具有很多优点。第一，其培养条件可以人为控制，摆脱了大自然中四季、昼夜的变化以及灾害性气候的不利影响，且条件均一，对植物生长极为有利，
便于稳定地进行周年生培养。第二，其生长周期短，繁殖率高。第三，管理方便，利于工厂化生产和自动化控制，与盆栽、田间栽培等相比省去了中耕除草、浇水施肥、防治病虫等一系列繁杂劳动，可以大大节省人力、物力及田间种植所需要的土地。
组织培养一方面可为转基因育种提供理想的受体材料，另一方面又可为常规的植物改良程序提供一种新的手段，从而使很多用传统方法难以解决的问题迎刃而解，更多更快地创造出各种农作物和园艺植物的新品种、新类型和新种质。总的来看，组织培养在植物改良中发挥了主要的作用，相信随着培养的技术不断的进步，其将会发挥更大的作用。
一、 实验目的
1. 了解与掌握植物组织培养的原理和过程。
2. 了解与学习植物组织培养的相关操作技术。
3. 通过学习植物组织培养技术学习自我总结、自我反思，让自己在今后的学习与生活中也能像做组织培养那样细心、有条理。
二、 实验原理
动物细胞的分化一般是不可逆的，植物则不同。只要具有一个完整的膜系统和一个有生命力的核，即使是已经高度成熟和分化的细胞，也还保持着回复到分生状态的能力。
把已分化组织中不分裂的静止细胞从母体植株上分离下来置于一种能促进细胞增殖的培养基上培养，细胞内就会发生某些变化，例如在休止期间由于溶酶体的破坏活动而丧失了功能的细胞组分又恢复了功能等，从而使细胞进入分生状态。一个成熟转变为分生状态并形成未分化的愈伤组织的现象称作“脱分化”。在组织培养中，把如上述由活植物体上切取下来以进行培养的那部分组织或器官叫做外植体。外植体通常都是多细胞的，并且组成它们的细胞常常包括各种不同的类型，因此由一个外植体所形成的愈伤组织也是异质性的，其中不同的组分细胞具有不同的形成完整植株的能力，即不同的“再分化”能力。
一个植物细胞能产生一个完整植株的固有能力称这为细胞的全能性（Cell
totipotency）。换句话说，细胞全能性是指植物细胞具有全套遗传信息，不管是性细胞还是体细胞，在特定环境下仍能进行表达，而产生一个独立完整的个体。
细胞一旦脱离了母体植株，摆脱了原来所受到的遗传上的控制和生理上的制约，在一定的培养条件下，就会发生一种回复变化，从而失去分化状态，变为分生细胞，实现脱分化过程。然后，这些脱分化细胞经过连续的.有丝分裂，形成愈伤组织，即指在人工培养基上外植体长出来的一团无序生长的薄璧细胞。
脱分化细胞不断进行分裂，从而形成了愈伤组织，愈伤组织在培养基上生长一段时间以后，由于营养物质枯竭，水分散失，以及代谢产物的积累，必须转移到新鲜培养基上培养。这个过程叫做继代。
当试管苗在瓶内长满并长到瓶塞，或培养基利用完时就要转接，进行继代，可迅速得到大量试管苗，以便到一定数量时进行移栽。能否保持试管苗的继代培养，是能否得到大量试管苗和能否用于生产的重要问题。
因此，按培养过程可分为初代培养和继代培养两种类型：
（1）初代培养（Primary culture）：指外植体的最初培养。
（2）继代培养（Subculture）：将初代培养得到的培养体移植于新鲜培养基中这种反复多次移植的培养，称为继代培养。
若按照组织培养的材料可分为：（1）组织、器官或细胞培养：指利用生物体各部分组织、器官或细胞进行离体培养，使之形成愈伤组织或完整有机体的技术。
（2）原生质体培养：指将微生物或植物细胞游离成原生质体，在适宜培养条件下，依据细胞全能性使其再生细胞壁，并进行细胞分裂分化，形成完整个体的技术。
篇3：植物组织培养
脱分化
再分化
三、 实验材料和仪器
材料：烟草的叶片， MS培养基所需的各类药品，蔗糖，琼脂，1mol/L的NaOH，
1mg/ml的6―BA，70%酒精，升汞溶液，无菌水
仪器：电子天平，玻璃棒，大烧杯，移液管，洗耳球，量筒，搪瓷杯，电炉，
pH计，漏斗，牛皮纸，培养皿，组培瓶，锥形瓶，滤纸，高压蒸汽灭
菌锅，无菌操作台，镊子，解剖刀，酒精灯
四、 实验步骤
（一）配制母液
1.根据书上的相关数据计算配制母液所需药品的用量，和小组其他成员检查核对数据，确定用量。（具体用量见表1）
2.将所需的药品准备好，按照表1的数据进行母液的配制，配制好后写好标签，按顺序摆放好母液。
注意事项：
1.计算配制母液药品用量时要小心仔细，不要出现计算错误。计算完毕后应和小组成员仔细核对，以确保计算无误。
2.在称取药品时一定要看清药品的名称和用量，例如不要将K2HPO4 看成是KH2PO4。
3.配制完母液后要写清标签，切勿弄混。
（二）MS培养基制备
1..在搪瓷杯里加入适量的水，按照表2，依次将溶液加入搪瓷杯中，搅拌。
2..将所得溶液定容到1L，调pH值，使pH＝6.0。
3.称取琼脂条10g，放入搪瓷杯中，放于电炉上加热，待琼脂条完全融化后将其
移开，置于室温下冷却。
4.待其冷却一会儿（不烫手时）后将其分装，总共分装18瓶。用牛皮纸包好瓶
口，扎上棉线。
5.将其和组培瓶、剪刀、镊子、培养皿、滤纸、装有适量水的锥形瓶放入高温灭
菌锅中灭菌。表1
表2
注意事项：
1. 调试pH值要在加热之前，因为温度会影响溶液的pH。
2. 在加热过程中要有人照看，以免溶液因为沸腾而喷洒出来。
3. 在分装时一定要小心，勿将液体培养基倒在瓶口上，如不小心沾上，要小心擦拭干净。
（三）初代培养的接种
1. 将所需用具组培瓶、培养皿、滤纸、镊子、解剖刀、无菌水从灭菌锅取出，准备好75%的酒精，升汞，酒精棉，酒精灯，将它们按一定顺序排好待用。
2..接种前用酒精棉擦手，然后换一块酒精棉擦拭工作台面，再换一块酒精棉擦拭镊子和解剖刀，在等待酒精挥发的同时将锥形瓶的棉线解开，将棉线理好后放在腿上。
3.采集一片长势完好的烟草叶片，用75%酒精浸泡数秒钟，然后用升汞溶液浸泡3min到5min，之后取出，用无菌水漂洗3次。
4.将消毒后的叶片置于无菌滤纸上，用解剖刀将叶片边缘和两端切去，留下主脉及其附近的叶肉，后将剩下的叶片切成1cm2左右大小的外植体。
5.左手拿装有培养基的锥形瓶底部，右手轻轻取下包头纸，将锥形瓶的瓶口靠近酒精灯火焰，瓶口倾斜，。然后用灼烧后冷却的镊子将外植体移入瓶中，叶片背面与培养基接触，轻轻按压使植物能紧贴培养基。镊子使用后放回消毒酒精中，将瓶口在火焰上旋转灼烧数秒钟，后包扎好瓶口，作好标记。
6.定期观察烟草的叶片的生长状况，及时记录并拍照。
注意事项：
1.用酒精棉给手和台面以及镊子和解剖刀消毒时要离酒精灯远一点，待酒精挥发干后才可以靠近酒精灯，避免发生危险。
2.用升汞消毒时要避免消毒时间过长，以免破坏其组织。在消毒过程中要适时晃动一下组培瓶，使叶片与升汞充分接触。
3.切叶片时切忌切的太小。
4.取下的牛皮纸向下摆放，放好叶片再次用牛皮纸包上锥形瓶之前要用火烧一下瓶口，切忌牛皮纸碰到瓶口。
五、 实验结果
第一次观察
第二次观察
六、 实验分析与讨论
通过照片可以看出，此次实验成功地长出了愈伤组织。愈伤组织在培养基上生长一段时间以后，由于营养物质枯竭，水分散失，以及代谢产物的积累，必须转移到新鲜培养基上培养。此次实验由于课时的限制，所以只进行了初代培养。
植物组织培养是看似简单实则是很不容易的一门技术。它要求我们每次做实验都必须要认真、仔细、有条理。不管是哪一次实验，只要其中的一个环节出错，就有可能导致整个实验的失败。所以，认真仔细有条理是做组培的基本条件。
在这次实验中，经过回想与总结，得出了以下的一些经验：
1.大量元素的配制：
首先是要确定药品，不要将药品名称看错。例如不要将K2HPO4 看成是KH2PO4。 这两样东西看起来虽然差不多，其实会对实验产生很大的影响。KH2PO4是酸性的，在此
次实验中和其他药品不会产生沉淀，而K2HPO4是碱性的，在此次实验中会和Mg2+形成
沉淀，影响实验。在配制大量元素无机盐母液时，还要防止在混合各种盐类时产生沉淀，各种药品必须在充分溶解后才能混合，同时在混合时要注意先后次序，把钙离子(Ca2+)、锰离子(Mn2+)、钡离子(Ba2+)和硫酸根离子(SO42-)、磷酸根离子(PO43-)错开，以免KH2PO4和MgSO4与CaCl2等发生作用，相互结合生成硫酸钙、硫酸钡、磷酸钙或磷酸锰沉淀。在混合各种无机盐时，其稀释度要大，慢慢地混合，同时边混合边搅拌。
2.微量元素的配制：
在配制微量元素混合母液时也要注意药品的添加顺序，以免产生沉淀。
3.铁盐的配制：
铁盐必须单独配制，因为与其他母液混合容易产生沉淀，在培养基中，采用螯合铁的形式配制，即硫酸亚铁和Na2-EDTA的混合物，在pH值7.6~8.0时也可保证铁的供应源。
4.母液的保存：配制好的母液应分别贴上标签，注明母液号、配制倍数、日期。
5.MS培养基配制过程，要注意调试pH是在加热之前，不能加热之后再调pH，因为温度会对其产生影响，会导致pH偏大。在分装的过程中要注意不要将培养基倒在瓶口
上，这样容易受污染。如不小心瓶口沾上，要小心将其擦拭干净。
6.初代培养接种过程，在开始的时候不要急着做实验，要将所有的东西准备好，先在大脑里演示一遍整个实验的过程以及注意事项，确定无误后再开始做实验。实验过程中一定要保持头脑冷静，做到有条不紊。
整个组培的学习过程是有趣的，通过这次的学习，知道了自己的一些不足，在以后的学习生活中，我会一点一点的改正。
篇4：叶子花组织培养技术研究
叶子花组织培养技术研究
通过对叶子花(Bougainvillea glabra Choisy)茎尖组织培养技术的研究,筛选出适宜的.增殖培养基为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L,增殖系数达到4.0;最适合的生根培养基为MS+IBA1.0 mg/L,每株平均生根7.2条,根长4.2 cm,侧根数4.5条.以河沙为基质进行试管苗移栽有利于叶子花的成活,25d后成活率可达78.6%.
作 者：郭海滨 代汉萍 雷家军 作者单位：沈阳农业大学园艺学院,辽宁,沈阳,110161 刊 名：安徽农业科学 ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES 年，卷(期)： 34(1) 分类号：Q943.1 关键词：叶子花 茎尖 组织培养篇5：蝴蝶兰组织培养研究进展
蝴蝶兰组织培养研究进展
通过不同培养基、不同激素及添加物对蝴蝶兰各培养再生途径的`影响进行了概述,为蝴蝶兰的组培技术研究提供参考.
作 者：张东旭 张洁 张学兵 董国兴 作者单位：张东旭,张学兵,董国兴(华乐种苗有限公司,河北,涿州,072750)张洁(河北农业大学生命科学学院)
刊 名：现代农业科技 英文刊名：XIANDAI NONGYE KEJI 年，卷(期)： “”(15) 分类号：Q943.1 S682.31 关键词：蝴蝶兰 组织培养 研究进展篇6：玉米组织培养研究进展
玉米组织培养研究进展
近些年来玉米组织培养技术发展十分迅速,玉米组织培养技术作为一种新型的科研技术,越来越受到人们的'重视.浅谈植物组织培养技术的基本原理、意义及面临的一些问题,综述了玉米子房和幼胚系统的组织培养研究、玉米茎尖和根尖离体培养研究和玉米花粉和花药培养研究.
作 者：位昕禹 WEI Xin-yu 作者单位：黑龙江省农业科学院黑河分院,黑龙江黑河,164300 刊 名：黑龙江农业科学 英文刊名：HEILONGJIANG AGRICULTURAL SCIENCES 年，卷(期)：2009 “”(2) 分类号：S513 关键词：组织培养 原理 玉米篇7：龙眼组织培养研究
龙眼组织培养研究
以龙眼茎尖或带腋芽茎段为材料,不经愈伤组织阶段直接诱导腋芽萌动、培养成苗的方法建立组培快繁体系.茎段萌芽诱导最佳激素组合为6-BA0.5mg/L+2,4-D10mg/L+GA3 0.5mg/L和6-BA0.5mg/L+IAA 0.2mg/L+GA3 0.5mg/L,萌芽率都是94.896%;萌芽系数最佳的激素组合为6-BA0.3mg/L+IAA0.1mg/L+GA3 0.5mg/L,达4.15;萌芽率与萌芽系数呈反相关.生根诱导最佳激素组合为6-BA 0.05ms/L+IBA0.5mg/L和6-BA0.05mg/L+IBA1.0mg/L,生根率均为66.6667%.
作 者：黎明 杨洁浩 李映志 作者单位：黎明(广东省茂名市鉴江流域水利工程管理局)杨洁浩,李映志(广东海洋大学农学院)
刊 名：中国热带农业 英文刊名：CHINA TROPICAL AGRICULTURE 年，卷(期)： “”(3) 分类号：S6 关键词：龙眼 芽诱导 生根诱导篇8：柱花草组织培养研究
柱花草组织培养研究
以6个柱花草品种为材料,研究了柱花草愈伤组织的诱导、芽和根的分化等组织培养技术,结果表明,外值体和培养基对柱花草组织培养的影响较大.愈伤组织的诱导,6个品种之间无显著性差异,但不同的外值体却表现出极显著的差异,其中真叶的出愈率最高;芽和根的'分化,真叶的分化系数、生根率和生根系数最高,最佳芽和根的分化培养基分别为MS+1.0 mg/L NAA+ 4.0 mg/L KT,1/2MS+1.0 mg/L NAA+ 0.5 mg/L KT.
作 者：钟军 智旭丹 杨波 ZHONG Ju-na ZHI Xu-dan YANG Bo 作者单位：钟军,ZHONG Ju-na(湖南农业大学,农学院,湖南,长沙,410128;湖南农业大学,湖南农业大学细胞工程实验室,湖南,长沙,410128)智旭丹,杨波,ZHI Xu-dan,YANG Bo(湖南农业大学,细胞工程实验室,湖南,长沙,410128)
刊 名：湖南农业大学学报（自然科学版） ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF HUNAN AGRICULTURAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCES) 年，卷(期)： 32(5) 分类号：Q949.751.9 关键词：柱花草 组织培养 外植体 培养基篇9：蝴蝶兰的组织培养技术
毛红丽
（襄阳职业技术学院．湖北寰阳441050）
【摘要】探讨了蝴垛兰的组织培养技术和方法。实验证明：用幼叶在散射光下培养诱导蝴蝶兰原球茎的效果最好，最适培养基为：MS＋6一BAlomg／L＋NAAlmg／L水解乳蛋白500mg／L＋蔗培养基为：MA＋6一BA2mg／L＋NAAlmg／L＋
309／L＋琼脂79／L（pH值5．4）；曩适增殖
解乳蛋白500mg／L＋蔗．糖309／L＋琼．．脂79／L（pH值5．4）；曩适生根长苗培
79／L（pH值5．4）。
养基：1／2MS＋IBAl．5mg／L＋NAA0．05mg／L＋O．3％／g＂性炭＋蔗糖309／L＋琼．
［关键词】蝴蝶兰；原球茎；组织培养
蝴蝶兰是单茎性气生兰．植株极少发育侧芽，且种子极难萌发，对其进行常规性的繁殖，增殖速度很慢。影响了它的推广和应用。笔者通过对蝴蝶兰的组织培养技术的研究。旨在提高
蝴蝶兰的繁殖系数。
2个月后统计原球茎的增殖倍数和原球茎的大小。
以上培养基中另添加500me／L的水解乳蛋白。79／L琼脂和30dL蔗糖，pH值5．4。培养条件均为25℃，光照时间16h。光照
强度20001）【。1．3壮苗与生根
1材料与方法
将增殖培养所得到的蝴蝶兰小苗转接到各种生根培养基（见表4），每处理10瓶，每瓶3株，重复3次。培养30d后统计
1．1实验材料苗的生长情况和生根率、平均生根率。
生根培养基中加入0．3％的活性碳＋蔗糖309／L＋琼脂79n．。
培养条件均为25℃，光照时间16h．光照强度2000h。
从陕西省西安市鼎天农业科技有限公司购买的大红品系的34月龄蝴蝶兰幼苗。
1．2实验方法
1．2．1外植体的消毒。从蝴蝶兰植株上取下幼叶（分14d、30d）
2结果与分析
和气生根尖，放在自来水下冲洗干净。在超净工作台上，将叶和根尖放入无菌瓶。用75％酒精消毒30s。然后用无菌水清洗2．3遍．再用0．1％升汞溶液浸泡lOmin（分钟），用无菌水冲洗4―5
遍后待用。
1．2．2原球茎的诱导。将幼叶切成5x5mm见方的小块和10ram长根尖，平放或按极性接种以MS为基本培养基。添加激索
2．1
不同的外檀体诱导原球茎的差异
对蝴蝶兰根尖、生长龄为14d的幼叶和生长龄为30d的叶
进行原球茎的诱导实验。结果表明（表1）：幼叶的诱导率最高为47％。它的褐变率最低。只有6％。成熟叶的诱导率很低且褐化严
重到47％。而根尖没有诱导出原球茎。可见生长龄为14，t幼叶
NAAImg／L和不同的浓度BA（2mUL、4mg／L、6mg／L、8ms／L、10mg／L）配比的诱导培养基上，并设置散射光和2000h两种作
比较，每瓶接种一个．每处理10瓶．重复3次。培养2个月后观
最有利于原球茎的产生。还发现在同一叶片上．叶基部的切块
较叶中和叶尖的切块诱导率高。对于比较小的幼叶，未切割时
也能诱导出原球茎。
2．2不同浓度的BA对原球茎诱导的影响
选用生长龄为14d．大小为lem左右、叶色墩绿的叶片为诱导材科。灭菌后接种到含不同浓度的BA培养基上培养。堵养15―20d发现叶片被切割周围产生浅绿色的原球茎状小突起．很次．能有效地控制菌核病的漫延。老黄叶也是菌核病和霜霉病等病害传播源．容易将病害传刭其他叶片，尤其受冻叶霜霉病重。摘除老黄叶则可防治或减轻菌核病等病害的发生。促进植株的生长发育。另外。油菜生长中后期要加强对蚜虫的防治，减
轻病虫害损失。
察统计不同外植体在不同培养基中原球茎的诱导率及生长情况。1．2．3原球茎的增殖。将诱导的原球茎按3―5个为一团接种刭以MS为基本培养基添加激素NAAlmsa．．和不同的浓度BA（0、2mgIL、4mg／L、6maL、8mg／L、10me／L）配比的增殖培养基中，培养苗肥多、长势好的田块一般不提倡在开春后施追肥．以免造成
贪青倒伏。
2．3加强病虫害管理
菌核病是油菜的主要病害，开花期和角果发育期最易发生，一般年份可减产l一3成．严重的可以造成大幅度减产甚至绝收．因此防治苗核病是实现油菜丰收的重要环节。首先要抓
好清沟排溃．捧除田间渍水．降低田问湿度．从而茂小病菌繁殖。其次是及时药剂踌治．可选用50％多菌灵可湿性粉卉畸0．1。
作者简介：
张英杰（1％7一’，女．湖北琏州人，l奚职生技术学院捌教授，主要从事种植专生麓学与科研工作。
0．2kg或40％菌核净O．1加．2kg免水50ks。在油菜花期防治1－2
―26一
万方数据
墨丝塑！塑丝兰笪绝堡堕鲞垫查
快发育成为原球茎。
由表2可知．不同浓度的BA对原球茎的诱导率和原球茎
的大小影响比较明品。随着BA浓度由2m班增加到10mgl，，原
囊＇
不同外粤体诱导原球茎的差异球茎的诱导率也由6＿33％逐渐增大．当BA为10mg／L时．诱导率最高达41．67％．说明高浓度BA促进原球茎的诱导。
但原球茎直径是随BA浓度的增大。由小到大．再由大到小。BA6mg／L时原球茎的直径最大为3．Smm。BAlomg／L时原球茎的直径最小为0．9mm。不足1mm。在实验中发现当原球茎不足Imm时。很难进一步增殖生长；诱导出的原球茎越大．越有利增殖生长。所以在原球茎的诱导实验中。选择BA的最佳浓度为6mg／L。
2．3不同光照条件对原球茎诱导的影响
在对原球茎进行诱导的过程中。发现外植体很容易褐化。抑制叶片揭化的方法是勤换培养基（10d换1次）．及时将叶片移入新鲜的培养基．可减轻褐化状况。培养时还发现，褐化的程度与培养时的光照强度有关，当光照强度为2000Ix时．叶片褐
化的程度较严重．
达40％左右：当光照强度为其他培养架反射过来的弱散射光时．褐化得到了较好的抑制．仅为lO％左右。
2．4不同浓度BA对原球茎增殖与诱导出苗的影响
将诱导出来的原球茎转接到增殖培养基中进行增殖培养。表3可知．不同浓度的BA对原球茎的增殖和原球茎的大小影响比较明显。随着BA浓度的增加，原球茎增殖倍数逐渐增加但原球茎的大小呈先升后下降趋势。当BA为10m＃L时。原球茎的增殖倍数虽达到最高7．12。但原球茎的大小最小为0．9。在原球茎增殖的同时。产生大量的`丛生芽．但丛生芽长得较为弱小；如果降低BA的浓度．当其为2mg／L原球茎的增殖系数减少。但形成的多而粗壮。所以BA的最佳浓度为2mg／L。
2．5原球茎的生根
壮苗
将增殖得到的小
苗转入到生根壮苗．培养基中。由表4可知。
当基本培养基为1，
2MS．NAA为005mgL．IBA为1．SmgL时。苗的生根率达到最高
500％．且苗的生长势最健壮。
万方数据
宣登量茭堕
3讨论
3．1
影响原球茎诱导的因素
在蝴蝶兰的同体培养中．进行原球茎诱导的外植体选择
时．明显地发现生长肥厚的幼嫩叶片的诱导率最为理想。这与杨美纯等的研究一致。在实验中还发现．叶基部的切块较叶中和叶尖的切块的诱导率高。在对叶片切割时，过多的切口会使叶片褐化死亡。所以在对幼叶切割时，将叶片从叶基部切下。可以获得最高的诱导率。
在原球茎的诱导过程中。BA的浓度对原球茎的诱导效率和生长势有很大的影响。在BA为0一lOmg／L的范围内．随着BA浓度的升高原球茎的诱导率也在增加，但原球茎的生长势却不好。近年来。一些研究只报道了BA浓度对原球茎诱导率的影响。却没研究对诱导出的原球茎的生长势的影响。笔者结合两方面的比较．确定最终的BA的浓度为6mg／L．这样诱导率比较高。且原球茎的生长状况良好。为原球茎的进一步增殖打下基础。光照条件也是影响原球茎诱导的一个重要因素。散射光有利于原球茎的诱导。并能有效地减轻叶片诱导时的褐化状况。3．2影响原球茎增殪的因素
在对蝴蝶兰原球茎的增殖实验中研究发现。随着BA浓度的增加。原球茎的增殖率提高。并且在不加BA的条件下。原球茎也能增殖．这可能是原球茎自己体内已积累了较高水平的细胞分裂素的缘故。这与周俊辉、王芳的报道一致，但与王亦菲、彭立新的结果不同。另外。从控制遗传变异方面考虑．不应使用高浓度的激素组合．以免原球茎多代增殖后形成异常苗。在实验中还发现．原球茎在切割时。不应切的太小．否则褐化情况严重。在接种时．原球茎应紧密的靠在一起．这样才能生长旺盛。从实验中可以得出原球茎在增殖生长时。具有较强的群体优势效应．与彭立心、马子骏和周俊辉的报道一致。3．3影响蝴蝶兰生根壮苗的因素
在蝴蝶兰生根壮苗培养中发现．1，2MS比MS的效果好。NAA浓度对出苗率没有多大影响。活性碳的添加．可以有效防止原球茎褐化．有利于小茁的生长。参考文献
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作者简介：
毛红膏（1961一）．女．t英职业技术学院生物工程学虎工作。
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篇10：青杨组织培养快速繁殖
青杨组织培养快速繁殖
建立了青杨( Populus cathayana) 组织培养系统.最适合的外植体是新切下的枝条插入含有蛭石和充足水的营养钵中24 h以上,使其在弱光下迅速长出嫩枝的茎切段和茎尖.茎切段和茎尖外植体经0.1% HgCl2 或5% NaClO溶液表面消毒后,接种到大量元素减半、含0.5 mg/L 6-BA和0.03 mg/L NAA的MS 培养基上诱导芽,试管苗的.生根采用含0.5 mg/L IBA的MS 培养基.试管苗茎段的分化依外源激素条件的不同而异.
作 者：耿飒 姬生栋 袁金云 周春娥 赵晓进 GENG Sa JI Sheng-dong YUAN Jin-yun ZHOU Chun-e ZHAO Xiao-jin 作者单位：河南师范大学,生命科学学院,河南,新乡453007 刊 名：河南师范大学学报（自然科学版） ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF HENAN NORMAL UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE) 年，卷(期)：2006 34(2) 分类号：Q944.6 关键词：芽 青杨 组织培养【桃儿七的组织培养】相关文章：
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